河池市100例地贫羊水产前诊断分析(1)
【摘 要】目的:探讨羊水产前诊断在地中海贫血(以下简称“地贫”)胎儿中的应用,通过羊水产前诊断,检出中、重型地贫儿,知情选择终止妊娠,降低出生缺陷。方法:采用GaP-PCR方法诊断中国人常见的东南亚型(--SEA)基因缺失、-α3.7基因缺失和 -α4.2基因缺失;采用反向斑点杂交法(PCR-RDB)检测常见的αT珠蛋白基因αCS、αQS 和αWS 3种点突变及17种β-地贫基因突变类型,对100例孕妇羊水进行产前地贫基因检测。结果:检测出正常胎儿 23例占 23%,异常胎儿77例占77%。其中,α-地贫胎儿 42 例占42%,β-地贫19 例占19%,α复合β-地贫16 例占 16%。结论:在孕中期对高危人群行羊水产前诊断可以有效地阻止中、重型地贫患儿的出生,从而降低出生缺陷。
【关键词】地中海贫血;产前诊断;羊水;出生缺陷
【中图分类号】R714 【文献标识码】A 【文章编号】1004-7484(2019)01-0245-02
地中海贫血(简称地贫)是一类由于α或β珠蛋白基因发生缺失或点突变,使其编码的人α或β珠蛋白链缺如或不足,导致严重的溶血性贫血[1]。全世界至少有3.45亿人携带地中海贫血的致病基因,我国长江以南各省区为高发区。根据珠蛋白肽链合成受到抑制的类型,主要分为α-地贫和β-地贫两种类型。α、β-地贫根据临床症状的严重程度不同,又可以分为静止型地贫、轻型地贫、中间型及重型地贫。静止型和轻型地贫无需特殊治疗,中、重型地贫除了输血外,国内外尚无有效的治疗方法,重点在于预防[2]。为探讨我市预防中、重症地贫的有效手段及其效果,现对来我院优生遗传门诊就诊的100例确诊为同型地贫基因携带夫妇的胎儿进行产前地贫基因诊断,将结果报道如下。
1 资料与方法
1.1 临床资料选取2016年1月~2017年12月在本院优生遗传门诊就诊的 100 对同型地贫基因携带者,通过优生遗传咨询,并知情选择进行羊膜腔穿刺术产前基因诊断夫妇,其中,同为α-地贫基因携带者 48 对,同为β地贫基因携带者19 对,同型地贫且一方为α复合β地贫携带者 33 对,孕妇年龄在19~42岁,孕周18~24周,受检夫妇均来自河池市户籍,术前签署知情同意书。
1.2 检测方法
1.2.1 标本采集孕妇排空膀胱,取仰卧位,常规严格无菌消毒,产前诊断医生在B 超引导下,用羊膜腔穿刺针穿刺进入羊膜腔,抽前2ml 羊水弃去,以防母体细胞污染,再抽取羊水20ml,分别置2根10ml無菌离心管中,每管10ml,交实验室人员,标本用于DNA 的初次提取及细胞培养后的二次平行实验。
1.2.2 基因检测
(1)α珠蛋白基因检测采用Gap-PCR方法诊断中国人常见的东南亚型(--SEA)基因缺失、-α3.7 基因缺失和 -α4.2基因缺失;采用反向斑点杂交法(PCR-RDB)检测常见的αT珠蛋白基因αCS、αQS和αWS 3种点突变型地贫基因,基因诊断试剂盒购自深圳益生堂生物企业有限公司,检测方法按试剂盒操作说明书进行。
(2)β珠蛋白基因检测采用PCR结合反向斑点杂交法(PCR-RDB),检测中国人常见的β-地贫17种基因突变类型,基因诊断试剂盒购自深圳益生堂生物企业有限公司,检测方法按试剂盒操作说明书进行。
1.3 遗传咨询 地贫基因诊断结果以书面报告形式送交到孕妇手中,随后由遗传医生对其进行遗传咨询并给予相应的医学建议,胎儿诊断为重型或中间型α或β-地中海贫血,告知胎儿预后,提出知情选择的医学指导意见。另外,根据产前诊断管理方案,羊水地贫基因检测报告由2名专业技术人员签发,审核人必须具备副高以上专业技术职称;检测结果的原始数据和标本必须保存至少3年,DNA标本须保存于-70℃[3]。
1.4 随访 100 例孕妇均在产前诊断后6个月由专人电话随访,了解中重型地贫胎儿结局、非中重型地贫胎儿出生后表型和发育情况。中重型地贫胎儿引产者,取胎儿脐血行地贫基因检测,其余继续妊娠分娩者,出生后2个月抽取外周血行地贫基因检测,以验证产前诊断结果的准确性。
2 结果
100例羊水标本中,检测出正常胎儿23例占 23%,异常胎儿77例占77%。其中,α-地贫胎儿42 例占42%,β-地贫19例19%,α复合β地贫 16 例占 16%。
2.1 夫妇为同型α地贫的产前诊断结果,见表1。
夫妇为同型α-地贫携带者共 48对,产前诊断检出正常胎儿 15例(31.25%),异常胎儿33例(68.75%),其中,静止型α-地贫6 例(12.50%),轻型α-地贫14例(29.17%),中间型α-地贫8例(16.67%),Bart’s 水肿胎 5例(10.42%)。
2.2 夫妇为同型β-地贫的产前诊断结果,见表2
夫妇为同型β-地贫携带者共19对,产前诊断检出正常胎儿7 例(36.84%),异常胎儿12例(63.16%),其中,轻型β-地贫7例(36.84%),重型β地贫5例(26.32%)。
2.3 夫妇一方为α复合β-地贫的同型地贫产前基因诊断结果,见表3。
夫妇同型地贫且一方为α复合β-地贫共33例,检出正常胎儿1例,异常胎儿32例,其中,静止型α-地贫3例,轻型α-地贫1例,中间型α-地贫4例,Bart’s 水肿胎1例。轻型β-地贫3例,重型β-地贫4例,α复合β-地贫16例(静止型α-地贫或轻型α-地贫复合轻型β-地贫9例,中间型α-地贫复合轻型β-地贫4例,重型α-地贫复合轻型β-地贫1例,静止型α-地贫或轻型α-地贫复合重型β-地贫2例 )。
2.4 随访 100 例行产前诊断的孕妇随访未发生术后并发症, 20例胎儿引产(包括7例Bart’s水肿胎,2例中间型α-地贫, 1例中间型α-地贫复合轻型β-地贫,8例重型β-地贫,2例重型β-地贫复合轻型α-地贫),引产胎儿取脐血行地贫基因诊断,其余继续妊娠胎儿,则出生后2个月抽取外周血行地贫基因检测,均与产前诊断结果一致。10例HbH病及1例重型β地贫胎儿母亲知情选择继续妊娠,这例重型β地贫胎儿孕妇在妊娠期间,当地卫计委及医务人员多次上门动员其终止妊娠,均不同意,只能尊重其意愿。所有胎儿出生后半年电话随访,除1例重型β地贫患儿需输血外,其他无重度贫血表型。, 百拇医药(杨艳)
【关键词】地中海贫血;产前诊断;羊水;出生缺陷
【中图分类号】R714 【文献标识码】A 【文章编号】1004-7484(2019)01-0245-02
地中海贫血(简称地贫)是一类由于α或β珠蛋白基因发生缺失或点突变,使其编码的人α或β珠蛋白链缺如或不足,导致严重的溶血性贫血[1]。全世界至少有3.45亿人携带地中海贫血的致病基因,我国长江以南各省区为高发区。根据珠蛋白肽链合成受到抑制的类型,主要分为α-地贫和β-地贫两种类型。α、β-地贫根据临床症状的严重程度不同,又可以分为静止型地贫、轻型地贫、中间型及重型地贫。静止型和轻型地贫无需特殊治疗,中、重型地贫除了输血外,国内外尚无有效的治疗方法,重点在于预防[2]。为探讨我市预防中、重症地贫的有效手段及其效果,现对来我院优生遗传门诊就诊的100例确诊为同型地贫基因携带夫妇的胎儿进行产前地贫基因诊断,将结果报道如下。
1 资料与方法
1.1 临床资料选取2016年1月~2017年12月在本院优生遗传门诊就诊的 100 对同型地贫基因携带者,通过优生遗传咨询,并知情选择进行羊膜腔穿刺术产前基因诊断夫妇,其中,同为α-地贫基因携带者 48 对,同为β地贫基因携带者19 对,同型地贫且一方为α复合β地贫携带者 33 对,孕妇年龄在19~42岁,孕周18~24周,受检夫妇均来自河池市户籍,术前签署知情同意书。
1.2 检测方法
1.2.1 标本采集孕妇排空膀胱,取仰卧位,常规严格无菌消毒,产前诊断医生在B 超引导下,用羊膜腔穿刺针穿刺进入羊膜腔,抽前2ml 羊水弃去,以防母体细胞污染,再抽取羊水20ml,分别置2根10ml無菌离心管中,每管10ml,交实验室人员,标本用于DNA 的初次提取及细胞培养后的二次平行实验。
1.2.2 基因检测
(1)α珠蛋白基因检测采用Gap-PCR方法诊断中国人常见的东南亚型(--SEA)基因缺失、-α3.7 基因缺失和 -α4.2基因缺失;采用反向斑点杂交法(PCR-RDB)检测常见的αT珠蛋白基因αCS、αQS和αWS 3种点突变型地贫基因,基因诊断试剂盒购自深圳益生堂生物企业有限公司,检测方法按试剂盒操作说明书进行。
(2)β珠蛋白基因检测采用PCR结合反向斑点杂交法(PCR-RDB),检测中国人常见的β-地贫17种基因突变类型,基因诊断试剂盒购自深圳益生堂生物企业有限公司,检测方法按试剂盒操作说明书进行。
1.3 遗传咨询 地贫基因诊断结果以书面报告形式送交到孕妇手中,随后由遗传医生对其进行遗传咨询并给予相应的医学建议,胎儿诊断为重型或中间型α或β-地中海贫血,告知胎儿预后,提出知情选择的医学指导意见。另外,根据产前诊断管理方案,羊水地贫基因检测报告由2名专业技术人员签发,审核人必须具备副高以上专业技术职称;检测结果的原始数据和标本必须保存至少3年,DNA标本须保存于-70℃[3]。
1.4 随访 100 例孕妇均在产前诊断后6个月由专人电话随访,了解中重型地贫胎儿结局、非中重型地贫胎儿出生后表型和发育情况。中重型地贫胎儿引产者,取胎儿脐血行地贫基因检测,其余继续妊娠分娩者,出生后2个月抽取外周血行地贫基因检测,以验证产前诊断结果的准确性。
2 结果
100例羊水标本中,检测出正常胎儿23例占 23%,异常胎儿77例占77%。其中,α-地贫胎儿42 例占42%,β-地贫19例19%,α复合β地贫 16 例占 16%。
2.1 夫妇为同型α地贫的产前诊断结果,见表1。
夫妇为同型α-地贫携带者共 48对,产前诊断检出正常胎儿 15例(31.25%),异常胎儿33例(68.75%),其中,静止型α-地贫6 例(12.50%),轻型α-地贫14例(29.17%),中间型α-地贫8例(16.67%),Bart’s 水肿胎 5例(10.42%)。
2.2 夫妇为同型β-地贫的产前诊断结果,见表2
夫妇为同型β-地贫携带者共19对,产前诊断检出正常胎儿7 例(36.84%),异常胎儿12例(63.16%),其中,轻型β-地贫7例(36.84%),重型β地贫5例(26.32%)。
2.3 夫妇一方为α复合β-地贫的同型地贫产前基因诊断结果,见表3。
夫妇同型地贫且一方为α复合β-地贫共33例,检出正常胎儿1例,异常胎儿32例,其中,静止型α-地贫3例,轻型α-地贫1例,中间型α-地贫4例,Bart’s 水肿胎1例。轻型β-地贫3例,重型β-地贫4例,α复合β-地贫16例(静止型α-地贫或轻型α-地贫复合轻型β-地贫9例,中间型α-地贫复合轻型β-地贫4例,重型α-地贫复合轻型β-地贫1例,静止型α-地贫或轻型α-地贫复合重型β-地贫2例 )。
2.4 随访 100 例行产前诊断的孕妇随访未发生术后并发症, 20例胎儿引产(包括7例Bart’s水肿胎,2例中间型α-地贫, 1例中间型α-地贫复合轻型β-地贫,8例重型β-地贫,2例重型β-地贫复合轻型α-地贫),引产胎儿取脐血行地贫基因诊断,其余继续妊娠胎儿,则出生后2个月抽取外周血行地贫基因检测,均与产前诊断结果一致。10例HbH病及1例重型β地贫胎儿母亲知情选择继续妊娠,这例重型β地贫胎儿孕妇在妊娠期间,当地卫计委及医务人员多次上门动员其终止妊娠,均不同意,只能尊重其意愿。所有胎儿出生后半年电话随访,除1例重型β地贫患儿需输血外,其他无重度贫血表型。, 百拇医药(杨艳)