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编号:13565374
肺癌细胞来源的顺铂处理的外泌体降低了肺癌细胞对顺铂的敏感性(2)
http://www.100md.com 2019年2月1日 《中国保健营养》 20192
     1.2提取exosomes、电镜制样和检测蛋白表达 收集培养48h后的培养液上清液,将上清液用离心机多次离心去除胞体和碎片杂质,取浓缩液,在4℃下继续离心得到的下层沉淀即是exosomes。

    将得到的exosomes沉淀溶解稀释,取20ul滴到铜网,室温下晾干,即可置于透射扫描电镜下进行观察并拍摄照片。

    1.3CCK-8法检测细胞的存活率 将A549肺癌细胞(对数生长期)接种到96 孔板中( 细胞数约6×103个/孔),24h后加入不同浓度梯度的顺铂(浓度为0-10μg/ml),培养48h。每孔加入100ul1:9的CCK-8和培养液,30min后,用紫外可见光分光仪在450nm波长下测吸光度。

    1.4统计学方法 所有数据均采用SPSS22.0软件进行统计分析,计量资料应用平均值±标准差( ),计量资料组间比较采用对照组独立样本t检验,计数资料以百分率(%)表示 ......
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