新型骨髓诱导支架对骨髓间充质干细胞成骨分化的体外评价(2)
1.6 Reverse Transcription-Polymerase Chain Reaction (RT-PCR)为了评估OBDBM的骨诱导性,本研究将rBMSC(1.0×10 5个细胞/ cm 2)分别接种于DBM和OBDBM表面,培养7天。检查rBMSCs中骨相关特异性基因的表达。本研究采用TRIzol提取各样本的总RNA,并用一步法逆转录试剂盒(百奥莱博,中国)完成逆转录及PCR反应。相关特异性引物(表1),包括骨桥蛋白(osteonectin, ON),碱性磷酸酶(alkaline phosphatase, ALP)以及甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH)由生工生物科技合成(中国)。PCR产物通过2%琼脂糖凝胶电泳后,在凝胶成像仪(伯乐,美国)下观察目的基因条带。
2 统计分析
所有数据均以平均值±S.D(标准偏差)表示,并使用SPSS 22.0进行分析。对于两组比较,应用双尾two-tailed Student t检验 ......
您现在查看是摘要页,全文长 3986 字符。