ATRA联合L-OHP对人肝癌细胞SMMC-7721的抑制作用(2)
1.2.2 细胞分组 分组:空白组:无细胞悬液,只添加100μL的培养基;平行对照组:1 mL/L无水乙醇;ATRA组10-5 mol/L ATRA(浓度设定参照相关医学研究[3]); L-OHP组1-L-OHP组3的 L-OHP浓度(浓度设定参照相关医学研究[4])分别为10mg/L、20mg/L、40mg/L;联合组1:10-5 mol/L ATRA、10 mg/L L-OHP)、联合组2:10-5mol/L ATRA、20 mg/L L-OHP;联合组3:10-5 mol/L ATRA、40 mg/L L-OHP。选取处于对数生长期的人肝癌细胞SMMC-7721,对其经过消化、离心后用含10%标准胎牛血清的DMEM高糖培养基调整到细胞密度为1×105/mL,用加样枪吸取90μL细胞悬液分别移入到96孔板的9个孔内(此前先用适量的含10%胎牛血清的DMEM高糖培养基铺底,空白组不加细胞悬液),于37℃、5%CO2培养箱内孵育24 h,确定细胞贴壁并生长状态良好后,按照上述的分组情况添加对应的试剂和药物。1.2.3细胞形态学变化、生长抑制率检测 观察细胞形态变化和生长曲线:确定细胞贴壁并生长良好并按照上述的分组情况添加对应的试剂和药物后,于24h、48 h、72 h时在显微镜下观察细胞形态变化。生长抑制率检测:采用MTT法进行细胞生长抑制率检测,分别在24h、48 h、72 h时将5 g/L的MTT溶液20μL加入到9组培养基中 ......
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