HPLC法测定菊明降压片中蒙花苷的含量(2)
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1.2.3 供试品溶液的制备 取本品10片,精密称定,研细,精密称取0.42g,置圆底烧瓶中,加入100ml甲醇,加热回流30分钟,称重,用甲醇补足减失重量,摇匀,滤过[14]。续滤液微孔滤膜过滤,取续滤液得供试品溶液。
1.2.4 测定法 分别取对照品、供试品溶液20ul供试品溶液,注入液相色谱仪,进行测定,记录数据,图谱。外标法[15]计算含量。
2 结果及讨论
2.1 样品测定的结果 样品测定结果及图谱如图1:
样品与对照品的图谱比较可知样品图谱中峰1为蒙花苷的峰。根据外标法计算,按每片药片中所含蒙花苷的毫克数记录结果:2.9518mg/片。
2.2 讨论
2.2.1 溶剂的选择 蒙花苷在甲醇中有良好的溶解度,所以选用甲醇为溶剂配制样品及标准品溶液。
2.2.2 检测波长的选择 24μg/ml的溶液,在紫外可见分光光度计上自400nm~200nm扫描,得到光谱扫描曲线。
由紫外吸收光谱的得知,样品溶液在波长为334nm处有较大光吸收度,故选择334nm为蒙花苷的测定波长。
2.2.3 线性关系考察 分别取储备液4.0ml、8.0ml、12.0 ml、16.0ml、20.0 ml、25.0 ml置于50 ml容量瓶中定容至刻度,得8.0μg/ml、16.0μg/ml、24.0μg/ml、32.0μg/ml、40.0μg/ml、50.0μg/ml 六种浓度的对照品溶液,分别用微孔滤膜过滤,得系列对照品溶液。分别取六种对照品溶液各进样20μl,按1.2.1的色谱条件进行测定。对照品溶液浓度与峰面积的数据记录如表3所示。
由以上数据计算得出回归方程:A=0 ......
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