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编号:11906902
水体中微囊藻毒素的污染状况和毒效应及其检测方法(2)
http://www.100md.com 2010年5月1日 沈菊芳
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     MC对肝细胞影响的特点是细胞凋亡与活跃的细胞增殖相伴随。胡志坚等建立MC促肝癌动物模型对MC的促癌作用进行了研究,结果显示,① MC可显著增加大鼠肝癌前指标γ-谷氨酰转肽酶(γ-GT)的阳性率;② MC可上调肝癌前病灶的主要凋亡抑制作用基因bc1-2的表达,同时可下调促细胞凋亡作用基因bax的表达。进一步证明MC有促癌作用,并且初步明确了调节与细胞凋亡相关的癌基因和抑癌基因表达可能是MC促癌过程的重要机制之一。MC作用于肝巨噬细胞,刺激细胞产生白细胞介素1(IL-1),IL-1再诱导产生可以引起急性炎症反应的物质,如前列腺素、血栓素及肿瘤坏死因子-δ(TNF-δ),这些物质导致了肝脏损伤和坏死,并引起炎症休克。此外一些实验还证实,MC是肿瘤促进剂,对免疫功能产生明显的抑制作用。

    5 微囊藻毒素的检测

    国内外对微囊藻毒素的检测方法目前可归结为3种:生物分析法、化学分析法和免疫学检测法。生物分析法是用动物急性毒性测定间接推算出MC的含量,一般无法准确定量。因此目前使用较多的是后2种方法。

    化学分析方法包括高效液相色谱(HPLC)、质谱分析(MS)以及薄层色谱(TLC)等。液相色谱方法可与二极管阵列检测器(DAD)、紫外检测器(UV)或毛细管电泳(CE)等联用,MS法成本较高,但灵敏度高;液质联用(LC/MS)快速而精确,即使没有标准毒素,在已知毒素相对分子质量情况下也可定性和定量检测;CE方法所需样品量少,采用激光诱导的荧光检测器能提高检测灵敏度。以上方法可用来对MC进行鉴别和定量,检出限可达几十到几百ng/L。这些方法分离效率高,分析时间短,样品体积小,但是多数方法必须通过与标准样品的比对才能定性、定量且对检测仪器精密度依赖程度高。

    免疫学检测法包括酶联免疫分析(ELISA)及蛋白磷酸酯酶抑制分析(PPIA),应用此类分析方法筛选毒素的优点是灵敏度高,在处理大批样品时分析速度快,工作原理简单 ......

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