血清ANCA检测在结缔组织病中的临床意义探讨
抗中性粒细胞胞浆抗体,自身抗体,小血管炎,自身免疫性疾病,系统性红斑狼疮,阳性率
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抗中性粒细胞胞浆抗体(antineutrophil cytoplasmic antibody，ANCA )是针对中性粒细胞颗粒成分和单核细胞溶酶体的自身抗体。根据间接免疫荧光的着染部位不同分为胞浆型(c-ANCA)和核周型(p-ANCA)。血清中的ANCA不仅与系统性小血管炎有明显相关，而且与自身免疫性疾病也有一定的关联性[1]。本文就血清ANCA检测在系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus，SLE)、类风湿关节炎(rheumatoid arthritis，RA)、原发性干燥综合征(prime sjogren syndrome，PSS)等结缔组织病(connective tissue disease，CTD)中的临床意义进行探讨。
1资料与方法
1.1对象
收集2010年1月—2012年12月我院门诊和住院的结缔组织病患者80例，男13例，女67例，年龄14～78岁，平均(39.4±17.2)岁。其中SLE患者25例，诊断标准按1982年美国风湿病学会修订的的分类标准；RA患者43例，诊断标准按1987年美国风湿病学会的诊断分类标准；PSS患者12例，诊断标准按1991年蒋明等[2]建议标准。另选取40例正常健康体检者为对照组，男7例，女33例，年龄18～79岁，平均(41.3±17.8)岁。
1.2方法
1.2.1标本采集采集所有受试者空腹静脉血3 mL，及时分离血清，置2～8℃环境保存。
1.2.2试剂与仪器ANCA检测采用间接免疫荧光法，试剂由德国欧蒙医学实验诊断有限公司提供，使用奥林巴斯BX43荧光显微镜。
1.2.3ANCA检测步骤将受试者血清与0.01 mol/L pH7.4的磷酸盐缓冲液(PBS-Tween)按1∶[KG-*2]10稀释，吸取25 μL滴加于生物薄片上，室温孵育30 min，用PBS-Tween缓冲液流水冲洗，以去除未结合的样品，然后将其浸泡于PBS-Tween溶液中5 min以上，加入30 μL荧光标记的抗人球蛋白。室温孵育30 min，避光反应，用PBS-Tween洗去未结合的抗体，然后将其浸泡于PBS-Tween溶液中5 min以上。经冲洗，甘油封片，于荧光显微镜下观察。以中性粒细胞中有特异性绿色荧光判定为阳性。阳性染色有两种荧光状态：胞浆不均匀颗粒样着色，并在细胞核核叶之间有重染者为c-ANCA；环绕着细胞核着色则为p-ANCA。
2结果
2.1患者及对照组血清ANCA检测结果
SLE患者血清ANCA阳性率为52.0%(13/25)；RA患者血清ANCA阳性率为48.8%(21/43)；PSS患者血清ANCA阳性率为16.7%(2/12)。正常对照组未检出。
2.2不同病组患者血清ANCA荧光模型
在ANCA阳性的SLE组患者中，c-ANCA阳性占30.8%，p-ANCA阳性占69.2%；在ANCA阳性的RA组PSS组患者也有一定数量的阳性(表1)。
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孔凡慧 浙江省立同德医院检验科;
【摘要】正抗中性粒细胞胞浆抗体(antineutrophil cytoplasmic antibody,ANCA)是针对中性粒细胞颗粒成分和单核细胞溶酶体的自身抗体。根据间接免疫荧光的着染部位不同分为胞浆型(c-ANCA)和核周型(pANCA)。血清中的ANCA不仅与系统性小血管炎有明显相关,而且与自身免疫性疾病也有一定的关联性[1]。本文就血清ANCA检测在系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)、类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)、原发性干燥综合征
【关键词】 结缔组织病 抗中性粒细胞胞浆抗体 临床意义 自身抗体 小血管炎 自身免疫性疾病 血清 检测 系统性红斑狼疮 阳性率
【分类号】R593.2
抗中性粒细胞胞浆抗体(antineutrophil cytoplas-mic antibody,ANCA)是针对中性粒细胞颗粒成分和单核细胞溶酶体的自身抗体。根据间接免疫荧光的着染部位不同分为胞浆型(c-ANCA)和核周型(p-ANCA)。血清中的ANCA不仅与系统性小血管炎有明显相关,而且与自身免疫性疾病也有一定
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