系统性红斑狼疮患者血清抗核小体抗体检测对临床应用价值
【摘要】目的：；分析血清抗核小体抗体(AnuA)对系统性红斑狼疮(SLE)在诊断和临床治疗应用价值。方法：用酶联免疫吸附(ELISA)方法检测60例SLE组患者、50例非SLE疾病对照组患者血清AnuA，同时用间接免疫荧光法检测患者血清抗核抗体(ANA)和抗双链(ds-DNA)抗体、酶免疫条带法检测其抗Sm抗体，进行统计学分析，评价抗核小体抗体在SLE诊断中的临床意义。结果：AnuA的敏感性和特异性。敏感性低于ANA (P<001)，高于抗ds-DNA抗体(P>005)、以及抗Sm抗体(P<001)；特异性高于ANA(P<001)，与抗ds-DNA抗体相同(P>005)，低于抗Sm抗体(P>005)。结论：抗核小体抗体对SLE的敏感性和特异性较高，与ANA、抗ds-DNA抗体和抗Sm抗体等自身抗体联合检测对SLE的明确诊断和临床治疗的重要意义。
【关键词】 系统性红斑狼疮；抗核小体；抗体；抗ds-DNA抗体；抗Sm抗体
【中图分类号】R457.2
【文献标志码】
B【文章编号】1005-0019(2018)06-021-01
系统性红斑狼疮是一种累及多系统、多器官的自身免疫性结缔组织疾病。患者血清中有多种自身抗体，基本病理改变是血管炎。本病临床表现多种多样，即「四多」：多系统、多器官、多种自身抗体、多见于生育期的女性。临床实验室有关系统性红斑狼疮疾病的诊断多涉及到的检测项目包括以下几个方面：(1)抗核抗体，简称ANA。抗核抗体具有极为突出的非特异性特征；(2)抗双链DNA抗体 ，ds-DNA抗体。此种抗体尽管具备良好的特异性，但在敏感度方面始终维持在较低水平；(3)抗Sm抗体。此种抗体尽管具备良好的特异性，但在敏感度方面始终维持在较低水平。本组病例选取临床已确诊为系统性红斑狼疮症状的患者为分析对象，对患者相关抗体指标进行系统检测，对系统性红斑狼疮与抗核小体抗体的关系，现报道如下。
1资料和方法
11一般资料SLE组患者60例，其中男8例，女52例，年龄18--63岁。非SLE疾病对照(NSLE)组为非系统性红斑狼疮的自身免疫性疾病患者，共50例，男性患者共计9例，女性患者共计41例，年龄17--59岁。临床症状；类风湿性关节炎26例、发性干燥综合症10例，多发性肌炎患者共计7例。50例患者标本由我院检验科采集。所有标本离心分离血清，控制温度-20℃下进行冻存，使用批量式的测定方法进行。
12检测方法对受试对象AnuA指标的检测方法选取为ELISA-酶联免疫吸附检测方法。同时，考虑到现阶段国际还没有形成有关AnuA指标的参考血清取值范围，因此标准品的表示以RU-相对单位为准。德国欧蒙实验制品有限公司推荐将相对单位的正常性取值上限确定为20RU/ml。在检测数值≥20RU/ml单位的情况下，判定样本为阳性属性。对受试对象抗核抗体、以及抗ds-DNA抗体指标的检测方法选取为IIF-间接免疫荧光法检测方法。在采取此种监测方法的情况下，对于检测结果的判定应当为：在检测结果显示为荧光模式的情况下，可判定受试对象的抗核抗体表现为阳性属性。同时，在按照1：10比例对血清样本进行稀释处理的条件下，显示绿蝇短膜虫动基体为均匀性荧光特点的检测样本，可判定为ds-DNA抗体为阳性属性。 对受试对象Sm抗体指标的检测方法选取为酶免疫条带法检测方法。在采取此种检测方法的情況下，对于检测结果的判定应当为：在酶免疫条带膜条相应区域呈现出灰色色泽的地带为阳性属性带 。以上相关指标检测过程中所选取的试剂盒均由均德国欧蒙实验制品有限公司所提供，严格按照说明书进行各环节的操作。
13检测设备OLYMPUS BX60荧光显微镜，HUMAN HUMAREADER半自动酶标仪。
14统计学方法本文中的所有实验数据采用SPSS120软件进行统计学分析，计量资料t检验，计数资料x2检验，并以p<005为差异有统计学意义。
2结果
21AnuA在SLE诊断中的特异性和敏感性从AnuA阳性率的角度上来说，SLE组与NSLE组对比，差异具有统计学意义(P<001或<005)(见表1)。从敏感性和特异性的角度来说，AnuA的敏感性显著低于ANA，高于抗Sm抗体，差异有统计学意义(均P<001)；高于抗ds-DNA抗体，但无显著性差异。 AnuA的特异性显著高于ANA(P<001)；与抗ds-DNA抗体相同，低于抗Sm抗体，差异无统计学意义(均P>005)(见表2)。
22AnuA在抗ds-DNA抗体和抗Sm抗体阴性的SLE患者中检出的阳性率在50例SLE患者中，AnuA和抗ds-DNA抗体均阳性者占560%；AnuA、抗Sm抗体均阳性者占140%。AnuA在抗ds-DNA抗体和抗Sm抗体阴性的SLE患者中检出的阳性率分别为476%(10/21)和738%(31/42)，提示AnuA对于抗ds-DNA抗体和抗Sm抗体检测具有较好的补充作用。具体数据如下表所示(见表3)。
3讨论
系统性红斑狼疮(SLE)是一种弥漫性、全身性自身免疫病，临床表现多种多样，单纯根据临床表现难以特异性诊断，因此，自身抗体的检测对SLE诊断要重要价值。抗sm是一类抗核糖核蛋白粒子抗体，其相应抗原由U-RNA和共同核心蛋白(即B，B，N，DI，D2，D3，E，G蛋白)组成。目前公认抗Sm抗体几乎仅见于SLE，是SLE的特异性标志之一，在SLE诊断中特异性最高，在患者血清中出现后将持续阳性，可作SLE回顾性诊断指标，不受病情活动及治疗影响。目前，诊断SLE的标志性抗体主要为抗ds—DNA抗体和抗sm抗体，这两种抗体诊断SLE的特异性高。本组病例分析结果显示，AnuA在SLE的诊断中具有很高的敏感性和特异性，其敏感性(76，0%)显著高于抗ds—DNA抗体(56，0%)和抗sm抗体(16，0%)，差异有统计学意义。而特异性(98，6%)则接近100%，这与文献报到结果相近，提示AnuA可作为SLE诊断有一标志性抗体。本组病例分析表明，在60例SLE患者中，AnuA和抗ds—DNA抗体均为阳性占56，0%；AnuA和抗sm抗体均为阳性占14，0%。AnuA在抗ds—DNA抗体和抗sm抗体阴性的SLE患者中检出的阳性率分别为47，6%和73，8%。说明AnuA与经典的SLE特异性抗体(抗dsDNA抗体和抗sm抗体)相关性较好，卡弥补其他自身抗体敏感性和特异性较低的不足，特别是对抗ds—DNA抗体和抗sm抗体阴性的SLE患者更有诊断意义[1]。AnuA可单独在SLE患者中出现，还可与ANA，抗ds—DNA抗体和抗sm抗体等自身抗体中的一种或多种同时出现，很多学者认为ANA抗ds—DNA抗体，抗sm抗体和AnuA等的低度与疾病活动性有密切关系，故联合检测血清中5种自身抗体可提高SLE诊断敏感性，可利于病情和疗效检测[2]。总之，AnuA对SLE的敏感性和特异性较高，卡作为SLE诊断的有一特异性抗体。AnuA与ANA，抗ds—DNA抗体和抗sm抗体等自身抗体的联合检测可提高SLE患者自身抗体的阳性检出率，并对SLE确诊后的病情发展和治疗监测有重要的临床意义和应用价值。提高SLE的检出率，对SLE病情的诊断，分型，治疗，追踪和预后判定有重要临床应用价值，因病例较少，经验欠缺，旨在进一步提高。
参考文献
[1]张素华，薛小萍.抗核小体抗体对系统性红斑狼疮的临床诊断价值及意义[J].国际检验医学杂志，2012，33(23)：2838-2839
[2]杨秉潜.四种自身抗体在系统性红斑狼疮诊断中的分析[J].中国民族民间医药杂志，2012，21(23)：22-23, http://www.100md.com(李强)
【关键词】 系统性红斑狼疮；抗核小体；抗体；抗ds-DNA抗体；抗Sm抗体
【中图分类号】R457.2
【文献标志码】
B【文章编号】1005-0019(2018)06-021-01
系统性红斑狼疮是一种累及多系统、多器官的自身免疫性结缔组织疾病。患者血清中有多种自身抗体，基本病理改变是血管炎。本病临床表现多种多样，即「四多」：多系统、多器官、多种自身抗体、多见于生育期的女性。临床实验室有关系统性红斑狼疮疾病的诊断多涉及到的检测项目包括以下几个方面：(1)抗核抗体，简称ANA。抗核抗体具有极为突出的非特异性特征；(2)抗双链DNA抗体 ，ds-DNA抗体。此种抗体尽管具备良好的特异性，但在敏感度方面始终维持在较低水平；(3)抗Sm抗体。此种抗体尽管具备良好的特异性，但在敏感度方面始终维持在较低水平。本组病例选取临床已确诊为系统性红斑狼疮症状的患者为分析对象，对患者相关抗体指标进行系统检测，对系统性红斑狼疮与抗核小体抗体的关系，现报道如下。
1资料和方法
11一般资料SLE组患者60例，其中男8例，女52例，年龄18--63岁。非SLE疾病对照(NSLE)组为非系统性红斑狼疮的自身免疫性疾病患者，共50例，男性患者共计9例，女性患者共计41例，年龄17--59岁。临床症状；类风湿性关节炎26例、发性干燥综合症10例，多发性肌炎患者共计7例。50例患者标本由我院检验科采集。所有标本离心分离血清，控制温度-20℃下进行冻存，使用批量式的测定方法进行。
12检测方法对受试对象AnuA指标的检测方法选取为ELISA-酶联免疫吸附检测方法。同时，考虑到现阶段国际还没有形成有关AnuA指标的参考血清取值范围，因此标准品的表示以RU-相对单位为准。德国欧蒙实验制品有限公司推荐将相对单位的正常性取值上限确定为20RU/ml。在检测数值≥20RU/ml单位的情况下，判定样本为阳性属性。对受试对象抗核抗体、以及抗ds-DNA抗体指标的检测方法选取为IIF-间接免疫荧光法检测方法。在采取此种监测方法的情况下，对于检测结果的判定应当为：在检测结果显示为荧光模式的情况下，可判定受试对象的抗核抗体表现为阳性属性。同时，在按照1：10比例对血清样本进行稀释处理的条件下，显示绿蝇短膜虫动基体为均匀性荧光特点的检测样本，可判定为ds-DNA抗体为阳性属性。 对受试对象Sm抗体指标的检测方法选取为酶免疫条带法检测方法。在采取此种检测方法的情況下，对于检测结果的判定应当为：在酶免疫条带膜条相应区域呈现出灰色色泽的地带为阳性属性带 。以上相关指标检测过程中所选取的试剂盒均由均德国欧蒙实验制品有限公司所提供，严格按照说明书进行各环节的操作。
13检测设备OLYMPUS BX60荧光显微镜，HUMAN HUMAREADER半自动酶标仪。
14统计学方法本文中的所有实验数据采用SPSS120软件进行统计学分析，计量资料t检验，计数资料x2检验，并以p<005为差异有统计学意义。
2结果
21AnuA在SLE诊断中的特异性和敏感性从AnuA阳性率的角度上来说，SLE组与NSLE组对比，差异具有统计学意义(P<001或<005)(见表1)。从敏感性和特异性的角度来说，AnuA的敏感性显著低于ANA，高于抗Sm抗体，差异有统计学意义(均P<001)；高于抗ds-DNA抗体，但无显著性差异。 AnuA的特异性显著高于ANA(P<001)；与抗ds-DNA抗体相同，低于抗Sm抗体，差异无统计学意义(均P>005)(见表2)。
22AnuA在抗ds-DNA抗体和抗Sm抗体阴性的SLE患者中检出的阳性率在50例SLE患者中，AnuA和抗ds-DNA抗体均阳性者占560%；AnuA、抗Sm抗体均阳性者占140%。AnuA在抗ds-DNA抗体和抗Sm抗体阴性的SLE患者中检出的阳性率分别为476%(10/21)和738%(31/42)，提示AnuA对于抗ds-DNA抗体和抗Sm抗体检测具有较好的补充作用。具体数据如下表所示(见表3)。
3讨论
系统性红斑狼疮(SLE)是一种弥漫性、全身性自身免疫病，临床表现多种多样，单纯根据临床表现难以特异性诊断，因此，自身抗体的检测对SLE诊断要重要价值。抗sm是一类抗核糖核蛋白粒子抗体，其相应抗原由U-RNA和共同核心蛋白(即B，B，N，DI，D2，D3，E，G蛋白)组成。目前公认抗Sm抗体几乎仅见于SLE，是SLE的特异性标志之一，在SLE诊断中特异性最高，在患者血清中出现后将持续阳性，可作SLE回顾性诊断指标，不受病情活动及治疗影响。目前，诊断SLE的标志性抗体主要为抗ds—DNA抗体和抗sm抗体，这两种抗体诊断SLE的特异性高。本组病例分析结果显示，AnuA在SLE的诊断中具有很高的敏感性和特异性，其敏感性(76，0%)显著高于抗ds—DNA抗体(56，0%)和抗sm抗体(16，0%)，差异有统计学意义。而特异性(98，6%)则接近100%，这与文献报到结果相近，提示AnuA可作为SLE诊断有一标志性抗体。本组病例分析表明，在60例SLE患者中，AnuA和抗ds—DNA抗体均为阳性占56，0%；AnuA和抗sm抗体均为阳性占14，0%。AnuA在抗ds—DNA抗体和抗sm抗体阴性的SLE患者中检出的阳性率分别为47，6%和73，8%。说明AnuA与经典的SLE特异性抗体(抗dsDNA抗体和抗sm抗体)相关性较好，卡弥补其他自身抗体敏感性和特异性较低的不足，特别是对抗ds—DNA抗体和抗sm抗体阴性的SLE患者更有诊断意义[1]。AnuA可单独在SLE患者中出现，还可与ANA，抗ds—DNA抗体和抗sm抗体等自身抗体中的一种或多种同时出现，很多学者认为ANA抗ds—DNA抗体，抗sm抗体和AnuA等的低度与疾病活动性有密切关系，故联合检测血清中5种自身抗体可提高SLE诊断敏感性，可利于病情和疗效检测[2]。总之，AnuA对SLE的敏感性和特异性较高，卡作为SLE诊断的有一特异性抗体。AnuA与ANA，抗ds—DNA抗体和抗sm抗体等自身抗体的联合检测可提高SLE患者自身抗体的阳性检出率，并对SLE确诊后的病情发展和治疗监测有重要的临床意义和应用价值。提高SLE的检出率，对SLE病情的诊断，分型，治疗，追踪和预后判定有重要临床应用价值，因病例较少，经验欠缺，旨在进一步提高。
参考文献
[1]张素华，薛小萍.抗核小体抗体对系统性红斑狼疮的临床诊断价值及意义[J].国际检验医学杂志，2012，33(23)：2838-2839
[2]杨秉潜.四种自身抗体在系统性红斑狼疮诊断中的分析[J].中国民族民间医药杂志，2012，21(23)：22-23, http://www.100md.com(李强)
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