3.2 Cre-Lox转基因敲除介导的单个盒式重编程载体 由于慢病毒能够感染不分裂和增殖的细胞，因而它成为体细胞表达重编程因子更好的运载体。但是这种方法有两种弊端，一是其效率达不到使用要求，二是存在慢病毒的载体可能整合进入iPS细胞的基因组中的风险。为解决这些弊端，研究采用开发一种单个盒式重编程载体，并在其中每个重编程因子能够彼此分开[2]，以自切肽信号的形式分布到每个载体中。这些载体中一部分就是构建LoxP位点，以此通过Cre重组酶的过表达来切断任何连续整合的序列。

    3.3 非病毒重编程方法

    3.3.1 mRNA转染 通过转染mRNA的方式使受体细胞表达重编程因子同样是一种无足迹制备iPS细胞的方法。有研究通过此方法在转染20天内人成纤维细胞重编程效率达到1.4%(Warren， Manos et al. 2010)。在此基础上，将Lin28因子、丙戊酸加入到Yamanaka重编程方案中，在O2下培养，重编程效率可以提高到4.4%。尽管重编程因子的mRNA能够买到，且效率较高，但目前除成纤维细胞以外并没有成功的案例。

    3.3.2 miRNA感染/转染 在胚胎干细胞中有几个miRNA簇得到强烈表达。当miR-302b和miR-372加上四种慢病毒Yamanaka因子合成模拟物添加到MRC5和BJ-1成纤维细胞后重编程效率比只加入四种慢病毒因子提高10-15倍(Subramanyam ......