液相色谱/质谱联用技术在盐酸克伦特罗残留中的应用(1)
【摘 要】盐酸克伦特罗被作为饲料添加剂非法添加到动物饲料中，造成中毒事件，引起人们广泛关注，其残留对人民健康造成严重威胁。因此，需要一种高灵敏度的有效检测方法。液相色谱/质谱联用技术灵敏度高、操作简便、耗时少且准确度高，被用于盐酸克伦特罗残留的检测。本文对盐酸克伦特罗和液相色谱/质谱联用技术做了简单概述，浅析了液相色谱/质谱联用技术在盐酸克伦特罗残留中的应用，以期为市场监测中快速检测盐酸克伦特罗提供参考。
【关键词】液相色谱/质谱联用技术；盐酸克伦特罗；残留；应用
【中图分类号】R155.5 【文献标识码】A 【文章编号】1005-0019(2018)23--01
1 盐酸克伦特罗概述
盐酸克伦特罗又名“瘦肉精”，属于肾上腺类神经兴奋剂，主要药理作用为：舒张及松弛子宫平滑肌、舒张支气管等，是一种临床上常见的平喘药。盐酸克伦特罗不是兽药，不能作为饲料添加剂非法使用。但是由于盐酸克伦特罗在人体和家畜内吸收比较好，一些不法商贩为了经济利益，在动物饲料中非法添加盐酸克伦特罗等瘦肉精，来提高动物蛋白质合成率，减少动物的脂肪生成，增加动物瘦肉量，缩短饲养时间，从而降低生产成本，增加利润。我国已明令禁止在动物饲料中添加瘦肉精，但是非法添加的情况仍然存在，造成“瘦肉精”中毒事件的发生，对人类生命健康造成威胁。因此，找到一种检测盐酸克伦特罗残留量的有效方法具有重大意义。目前用于检测盐酸克伦特罗残留量的方法主要有高效液相色谱法、生物传感技术、气相色谱/质谱联用技术、液相色谱/质谱联用技术等。其中高效液相色谱法耗时较长，灵敏度较低，假阳性率较高；生物传感技术检测范围有限，灵敏度不高，仅用于尿液、水溶液和血清中盐酸克伦特罗残留量的检测；气相色谱/质谱联用技术操作步骤繁多，待测物通常需要进行衍生化处理，操作耗时；而液相色谱/质谱联用技术耗时少、操作简单、抗干扰能力强、灵敏度高、确证能力强，被广泛用于盐酸克伦特罗残留量的检测。
2 液相色谱/质谱联用技术概述
液相色谱/质谱联用技术简称液质联用，是液相色谱与质谱串联的技术。主要由五部分组成：液相色谱仪、接口离子源与质谱的连接装置、质量分析器、真空系统以及计算机数据处理系统。样品进入液相色谱仪，经色谱柱实现分离，被分离组分依次从接口进入质谱仪，经离子源被离子化，离子于质量分析器中被聚焦，依据质荷比实现分离，离子信号转变成电信号，被传送到计算机数据处理系统，依据质谱峰强度及位置对样品中成分及其结构进行分析。目前，常用的液相色谱/质谱联用技术有两类：一类是从质量分析器的角度来划分，主要包括离子阱质谱仪、四级杆质谱仪、傅立叶变换质谱仪、飞行时间质谱仪；另一种是从离子源的角度来划分，主要包括大气压化学电离、电喷雾离子、基质辅助激光解吸离子化等。液质联用技术集液相色谱的高分离效能和质谱的强鉴别能力于一身，可以对样品准确定性定量。因此，被广泛应用于许多领域。
3 液相色谱/质谱联用技术在盐酸克伦特罗残留检测中的应用
王春民等[1]采用超高效液相色谱/串联质谱法对动物源食品中的克伦特罗、沙丁胺醇、莱克多巴胺以及特布他林四种瘦肉精进行检测分析。采用葡萄糖醛甙酶/芳基硫酸酯酶对样品进行酶解，用溶剂乙酸乙酯进行提取，经过固相萃取小柱的净化处理后，超高效液相色谱/串联质谱法测定。经过优化实验条件，实验结果表明：在1.0μg/L-25.0μg/L的浓度范围内，四种瘦肉精呈现良好的线性关系，线性相关系数为0.999，检出限均达到0.5μg/kg。加标水平下，回收率达到84%-105%。说明超高效液相色谱/串联质谱法可用于盐酸克伦特罗残留量检测。王娇等[2]利用高效液相色谱/串联质谱法测定猪肉中盐酸克伦特罗。结果发现：在1-20 ng/mL的浓度范围内，盐酸克伦特罗的色谱峰面积与浓度线性关系良好，相关系数达到0.9995，线性回归方程为：y=1.114x-0.012，检出限达到0.33 ng/mL。由此表明：高效液相色谱/串联质谱法可用于检测分析猪肉中的盐酸克伦特罗。
金慧然等[3]利用超高效液相色谱/串联质谱法对牛尿中克伦特罗等3 种β-兴奋剂残留量进行检测。经过提取和净化，有效地去除了样品中的杂质，经超高效液相色谱/串联质谱仪测定，结果发现：在0.5-5.0 ng/mL的浓度范围内，克伦特罗、莱克多巴胺和沙丁胺醇呈现良好的线性关系、回收率以及重现性，充分体现了该方法的高灵敏度、高精密度。表明超高效液相色谱/串联质谱法可用于检测牛尿中克伦特罗、莱克多巴胺和沙丁胺醇的残留量。陈蕾等[4]利用液相色谱/串联质谱法对猪肉中盐酸克伦特罗进行了快速检测，并建立了快速提取猪肉中盐酸克伦特罗的方法，对液相色谱/质谱/质谱联用仪分析条件进行了优化。用溶剂乙腈提取猪肉中的盐酸克伦特罗，研究对比了影响提取净化效果的三个因素：无水硫酸镁的加入量、填充料的加入量以及填充料类型。结果表明：在0.15μg/L-1.5μg/L的浓度范围内，盐酸克伦特罗线性关系良好，平均回收率可达到80%-120%，相对标准偏差为0.47%，检出限为0.5μg/L。说明液相色谱/串联质谱法简单、快速、可靠，可用于快速测定猪肉中的盐酸克伦特罗残留量。孟文瑛等[5]采用固相萃取/超高效液相色谱/串联质谱法对猪肉中的盐酸克伦特罗残留量进行测定，用5%的高氯酸对猪肉样品进行超声提取，高速离心15 min，用固相萃取柱富集和净化上清液，去除复杂的干扰基质，选择性地富集净化目标样品。試验结果表明：在0.25-50μg/kg 的浓度范围内，盐酸克伦特罗呈现良好线性关系，线性相关系数为0.9982，1.25、12.5、50μg/kg的添加水平下，平均回收率达到62.2%-72.0%，相对标准偏差为4.2%-6.1%，检出限达到0.05μg/kg。表明固相萃取/超高效液相色谱/串联质谱法高效、简便、准确、快速，可用于盐酸克伦特罗的选择性富集及分离检测。, http://www.100md.com(李翠萍)
【关键词】液相色谱/质谱联用技术；盐酸克伦特罗；残留；应用
【中图分类号】R155.5 【文献标识码】A 【文章编号】1005-0019(2018)23--01
1 盐酸克伦特罗概述
盐酸克伦特罗又名“瘦肉精”，属于肾上腺类神经兴奋剂，主要药理作用为：舒张及松弛子宫平滑肌、舒张支气管等，是一种临床上常见的平喘药。盐酸克伦特罗不是兽药，不能作为饲料添加剂非法使用。但是由于盐酸克伦特罗在人体和家畜内吸收比较好，一些不法商贩为了经济利益，在动物饲料中非法添加盐酸克伦特罗等瘦肉精，来提高动物蛋白质合成率，减少动物的脂肪生成，增加动物瘦肉量，缩短饲养时间，从而降低生产成本，增加利润。我国已明令禁止在动物饲料中添加瘦肉精，但是非法添加的情况仍然存在，造成“瘦肉精”中毒事件的发生，对人类生命健康造成威胁。因此，找到一种检测盐酸克伦特罗残留量的有效方法具有重大意义。目前用于检测盐酸克伦特罗残留量的方法主要有高效液相色谱法、生物传感技术、气相色谱/质谱联用技术、液相色谱/质谱联用技术等。其中高效液相色谱法耗时较长，灵敏度较低，假阳性率较高；生物传感技术检测范围有限，灵敏度不高，仅用于尿液、水溶液和血清中盐酸克伦特罗残留量的检测；气相色谱/质谱联用技术操作步骤繁多，待测物通常需要进行衍生化处理，操作耗时；而液相色谱/质谱联用技术耗时少、操作简单、抗干扰能力强、灵敏度高、确证能力强，被广泛用于盐酸克伦特罗残留量的检测。
2 液相色谱/质谱联用技术概述
液相色谱/质谱联用技术简称液质联用，是液相色谱与质谱串联的技术。主要由五部分组成：液相色谱仪、接口离子源与质谱的连接装置、质量分析器、真空系统以及计算机数据处理系统。样品进入液相色谱仪，经色谱柱实现分离，被分离组分依次从接口进入质谱仪，经离子源被离子化，离子于质量分析器中被聚焦，依据质荷比实现分离，离子信号转变成电信号，被传送到计算机数据处理系统，依据质谱峰强度及位置对样品中成分及其结构进行分析。目前，常用的液相色谱/质谱联用技术有两类：一类是从质量分析器的角度来划分，主要包括离子阱质谱仪、四级杆质谱仪、傅立叶变换质谱仪、飞行时间质谱仪；另一种是从离子源的角度来划分，主要包括大气压化学电离、电喷雾离子、基质辅助激光解吸离子化等。液质联用技术集液相色谱的高分离效能和质谱的强鉴别能力于一身，可以对样品准确定性定量。因此，被广泛应用于许多领域。
3 液相色谱/质谱联用技术在盐酸克伦特罗残留检测中的应用
王春民等[1]采用超高效液相色谱/串联质谱法对动物源食品中的克伦特罗、沙丁胺醇、莱克多巴胺以及特布他林四种瘦肉精进行检测分析。采用葡萄糖醛甙酶/芳基硫酸酯酶对样品进行酶解，用溶剂乙酸乙酯进行提取，经过固相萃取小柱的净化处理后，超高效液相色谱/串联质谱法测定。经过优化实验条件，实验结果表明：在1.0μg/L-25.0μg/L的浓度范围内，四种瘦肉精呈现良好的线性关系，线性相关系数为0.999，检出限均达到0.5μg/kg。加标水平下，回收率达到84%-105%。说明超高效液相色谱/串联质谱法可用于盐酸克伦特罗残留量检测。王娇等[2]利用高效液相色谱/串联质谱法测定猪肉中盐酸克伦特罗。结果发现：在1-20 ng/mL的浓度范围内，盐酸克伦特罗的色谱峰面积与浓度线性关系良好，相关系数达到0.9995，线性回归方程为：y=1.114x-0.012，检出限达到0.33 ng/mL。由此表明：高效液相色谱/串联质谱法可用于检测分析猪肉中的盐酸克伦特罗。
金慧然等[3]利用超高效液相色谱/串联质谱法对牛尿中克伦特罗等3 种β-兴奋剂残留量进行检测。经过提取和净化，有效地去除了样品中的杂质，经超高效液相色谱/串联质谱仪测定，结果发现：在0.5-5.0 ng/mL的浓度范围内，克伦特罗、莱克多巴胺和沙丁胺醇呈现良好的线性关系、回收率以及重现性，充分体现了该方法的高灵敏度、高精密度。表明超高效液相色谱/串联质谱法可用于检测牛尿中克伦特罗、莱克多巴胺和沙丁胺醇的残留量。陈蕾等[4]利用液相色谱/串联质谱法对猪肉中盐酸克伦特罗进行了快速检测，并建立了快速提取猪肉中盐酸克伦特罗的方法，对液相色谱/质谱/质谱联用仪分析条件进行了优化。用溶剂乙腈提取猪肉中的盐酸克伦特罗，研究对比了影响提取净化效果的三个因素：无水硫酸镁的加入量、填充料的加入量以及填充料类型。结果表明：在0.15μg/L-1.5μg/L的浓度范围内，盐酸克伦特罗线性关系良好，平均回收率可达到80%-120%，相对标准偏差为0.47%，检出限为0.5μg/L。说明液相色谱/串联质谱法简单、快速、可靠，可用于快速测定猪肉中的盐酸克伦特罗残留量。孟文瑛等[5]采用固相萃取/超高效液相色谱/串联质谱法对猪肉中的盐酸克伦特罗残留量进行测定，用5%的高氯酸对猪肉样品进行超声提取，高速离心15 min，用固相萃取柱富集和净化上清液，去除复杂的干扰基质，选择性地富集净化目标样品。試验结果表明：在0.25-50μg/kg 的浓度范围内，盐酸克伦特罗呈现良好线性关系，线性相关系数为0.9982，1.25、12.5、50μg/kg的添加水平下，平均回收率达到62.2%-72.0%，相对标准偏差为4.2%-6.1%，检出限达到0.05μg/kg。表明固相萃取/超高效液相色谱/串联质谱法高效、简便、准确、快速，可用于盐酸克伦特罗的选择性富集及分离检测。, http://www.100md.com(李翠萍)