凝血酶原时间(PT)测定是Quick1935年创立的一种外源性凝血系统的过筛试验[1],可综合反映因子Ⅰ、Ⅱ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅹ的血浆水平,是监测口服抗凝药和溶栓治疗最常用的方法。由于PT检测受多种因素干扰,因此,测定方法的规范化非常重要,现简述如下。

    1试剂的规格化

    PT测定的标准化,首先是试剂的规格化。PT试剂凝血活酶,是人脑、兔脑、牛肺、胎盘等组织提取物,其中以人脑提取物最敏感。PT试剂标准化有两条途径。⑴用同一种凝血活酶并规定统一的操作方法。⑵各地使用自制凝血活酶用一种参比试剂校正[2]。1977年WHO提供了第一批人脑凝血活酶作为国际参考试剂(IRP),此后IRP被原级试剂,编号BCT/253和次级试剂,编号RBT/79和OBT/79所取代[3]。2001年WHO提出以人脑凝血活酶67/40作为标准品,定ISI为1.0,即凝血活酶试剂共同的敏感指标是通过自制试剂与67/40标准品比较所得的校正值,称为国际敏感度指数(ISI:international sensitivity index),ISI愈低,精密度愈高[4]。因此厂家对每批凝血活酶制品均应标出ISI,以便计算INR。

    2检测方法和材料的规范化

    2.1血标本:⑴用硅化或塑料注射器抽静脉血,注入有盖塑料试管,避免溶血,或使用真空采血系统。⑵ 9份血液加入1份109mmol/L枸橼酸钠抗凝剂。⑶标本以2500g离心30min,使之成为乏血小板血浆。⑷标本宜在2h之内测定,时间过久V因子可能在室温中消失,Ⅶ因子可能在冷的条件下活化[5,6],脂血也可使Ⅶ因子活化[7],同时干扰以光学法为原理的凝血仪结果,此时可改用手工法或电子机械式凝血仪测定 ......