银杏茶对一次大量饮酒所致脑组织酶影响的研究
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[摘要] 目的 研究一次性大量饮酒所致脑组织酶的损伤及银杏茶和硒锌的保护作用。方法 首先建立一次性大量饮酒的小鼠动物模型，检测其血液中酒精的浓度和对其大脑进行病理解剖学检查；然后测定该动物模型以及正常动物脑组织中琥珀酸脱氢酶(SDH)的活性以及丙二醛(MDA)的含量水平。结果 一次酒精胃灌注可以使小鼠脑组织中SDH的活力显著降低；银杏茶和解酒片可以使降低的SDH活力显著升高恢复到正常水平；银杏茶可以使一次大量白酒灌胃升高的MDA含量显著降低恢复到正常水平(p<0.01)，银杏茶加硒则效果更好。银杏茶加锌可以使酒精摄入降低的SDH活力显著升高，以及升高的MDA显著降低到正常水平(p<0.01)。结论 一次性大量饮酒可以导致小鼠脑组织中SDH的活力显著降低及MDA显著升高，银杏茶、银杏茶加硒或加锌可以降低这种损伤作用。
[关键词] 急性酒精性脑损伤； 银杏茶； 硒； 锌； SDH； MDA
[中图分类号] R965 [文献标识码] A [文章编号] 1005-0515(2011)-05-036-01
近年来，一次大量饮酒或暴饮性饮酒导致急性酒精中毒引起研究者的注意。急性酒精中毒是指一次大量饮酒或酒醉，可出现急性神经精神症状：视敏度下降，共济失调，欣快感，严重者可出现瞳孔散大、眼球震颤，甚至昏迷造成猝死[1-2]，也可引起交通事故或治安事件。本课题于2010年5月-2011年5月首先建立一次大量饮酒的小鼠动物模型；探讨银杏茶、银杏茶加硒、加锌对一次大量饮酒所致脑损伤的保护作用。
1 材料与方法
1.1 实验材料和方法 动物采用昆明种小鼠，均为雄性，体重18-24g，由内蒙古大学实验动物中心提供，为清洁级动物。合格证书：SCXK(蒙)2002-0001。
实验主要试剂：市售银杏叶茶、富硒胶囊、葡萄糖酸锌、红星二锅头酒 (56%)购自内蒙古包头市某超市。琥珀酸脱氢酶(SDH)和丙二醛(MDA)检测试剂盒，购自南京建成生物工程研究所。
1.2 实验方法
1.2.1 动物分组及处理 将50只健康昆明种雄性小鼠按体重随机分为6组，每组10只，分别为空白对照组、白酒模型组、银杏茶组、银杏茶加硒茶组、银杏茶加锌6个组，其中空白对照组和白酒模型组饮用自来水；其他各组动物饮用溶于水的解酒胶囊、银杏茶水、银杏茶加硒水、银杏茶加锌水。其饮用量均按成人参考摄入量给予。各组大鼠均采用自由饮用的方式，连续饮用30天。实验期间，每周称一次体重，观察小鼠的一般状况。第30天时对小鼠进行一次大剂量空腹白酒胃灌注(56%白酒精，12ml/kg)。第二天取脑组织进行琥珀酸脱氢酶(SDH)和丙二醛(MDA)的检测。
1.2.2 白酒模型组小鼠血液酒精浓度检测 对小鼠进行一次大剂量空腹酒精胃灌注，灌注后16小时小鼠断头取血，静置凝固后离心血清，应用青岛SP-2100检测血液中酒精含量专用气相色谱仪 进行酒精含量检测；并进行病理学检查。
2 结果与讨论
2.1 实验动物的一般情况 在整个实验过程中，各组小鼠活动正常，健康状况良好，各组间在相应喂养周数平均体重无显著性差异，说明银杏茶等的摄入对小鼠体重无明显影响。
2.2 一次性大量饮酒的小鼠动物模型的建立及病理变化 在酒精胃灌注三小时后取动脉血进行血液酒精浓度检测，发现酒精胃灌注组血液中酒精水平均高于80 mg/dl，而对照组(蒸馏水胃灌注组)血液中没有发现任何酒精存在。说明一次性大量饮酒的小鼠动物模型确立。
同时对小鼠大脑进行病理解剖学检查，没有发现明显的大脑皮质萎缩，大脑周围空间以及脑室增大，显微镜下也没有发现明显的神经元细胞的变性和坏死，神经元细胞胞体萎缩、缺失，神经元细胞轴突和树突的数目减少，也没有神经胶质细胞的增生、水肿和脱髓鞘等继发性病理改变(图1)。说明一次大量饮酒并不会造成脑组织明显的形态学改变。
表1 单次酒精灌注后小鼠脑内相关生物标记物活力/水平的变化
注: p<0.01,与空白对照组比较，非配对t检验。
正常对照组 酒精灌注组
图1 急性暴饮性饮酒/一次性饮酒动物模型--小鼠脑的病理学检查 (′200)。
2.3 琥珀酸脱氢酶(SDH)和丙二醛(MDA)的检测结果 小鼠脑组织中SDH的活力和MDA的含量水平测定结果见表2，与空白对照组相比一次大量白酒胃灌注可以显著降低脑组织中SDH的活力；显著升高脑组织中MDA的含量。SDH参与抗氧自由基作用，而MDA的水平可以间接反映机体内氧自由基的水平，可与蛋白形成共价化合物进而导致细胞毒性损伤。所以一次大量酒精摄入引起显著的SDH活力降低以及MDA含量水平的升高可以反映氧自由基导致脑组织损伤。
银杏茶组和硒茶组的MDA含量水平不但恢复而且低于正常对照组MDA含量水平。银杏茶组和锌茶组的SDH活力水平不但恢复而且高于正常对照组SDH活力水平(表2)。
表2 各实验组小鼠SDH活力和MDA含量比较
注:#:p<0.01,与正常对照组比较，非配对t检验。
*:p<0.01, 与乙醇组比较，单向方差分析及Bonferroni多项比较检验。
银杏茶、银杏茶加硒、银杏茶加锌均可以使由一次大量白酒摄入降低的SDH活力以及升高的MDA含量恢复到正常水平，银杏茶加硒组对于单次大量酒精摄入升高的MDA含量降低效果更好 ......
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