白细胞介素12和4的水平对评估卡介菌多糖核酸治疗哮喘疗效的意义
【摘要】 目的探讨卡介菌多糖核酸治疗前后哮喘病人血清白细胞介素12(IL—12)和白细胞介素4(IL—4)水平变化及其临床意义。方法 79例哮喘病人,男性53例,女性26例,年龄42—76岁,病程6mo—7a,所有病人给予注射卡介菌多糖核酸(浙江万马药业有限公司生产,批号:20090105)1.0mg, im qod, 3mo为一个疗程。结果 对卡介菌多糖核酸完全应答者61例,部分应答者16例,无应答者2例。完全应答组卡介菌多糖核酸治疗后IL—12升高,IL—4降低,且治疗后各时间点同治疗前相比有统计学意义(P<0.05),部分应答组治疗后IL—12升高,IL—4降低,但两者仅治疗后3mo同治疗前相比有统计学意义(P<0.05)。结论 卡介菌多糖核酸治疗应答状况与治疗后血清IL—12和IL—4水平变化有关,动态检测IL—12和IL—4水平可以作为卡介菌多糖核酸用药及疗效判定的免疫学指标。
【关键词】 卡介菌多糖核酸;白细胞介素12;白细胞介素4;哮喘
【中图分类号】R562.2+5【文献标识码】 C 【文章编号】1005-0515(2010)005-085-02
, 百拇医药
哮喘是以嗜酸粒细胞(EOS)、肥大细胞等多种炎症细胞及细胞因子(CKs)共同参与而引起的气道慢性变态反应性炎症,是患者吸入致敏原后由lgE介导的变态反应性疾病[1]李晓萍[2]在对茶碱的再认识中曾提到哮喘时IL-12分泌下降,而用茶碱后通过刺激TH2细胞使IL-12分泌升高,抗炎效果增强。近年也有研究提示,T淋巴细胞在哮喘发病及气道高反应性(BHR)发生中具有重要作用〔3〕。目前发现哮喘病人存在Th1/Th2细胞因子失衡和IL-12表达低下,卡介菌多糖核酸可通过诱导外周血CD4+T-IL-12表达,下调IL-4表达,纠正病人免疫紊乱而提高临床疗效。因此,测定IL-12,IL-4能大体上了解机体Th应答模式。本文通过检测卡介菌多糖核酸治疗前后病人血清IL-12和IL-4水平的变化,研究血清IL-12,IL-4水平与卡介菌多糖核酸治疗反应之间的关系,以探讨检测血清IL-12和IL-4水平作为卡介菌多糖核酸疗效评价指标的可能性。
病例选择慢性哮喘病人79例,其诊断均符合中华医学会呼吸病学分会制定的标准[4],其中男53例,女26例,年龄42-76岁,病程6mo-7a。受检者治疗前均未行免疫调节治疗。另外,选择31例正常人作为对照,这31例正常人中男性19例,女性12例,年龄45-72岁。
, 百拇医药
设计方案和治疗方法本方案采用治疗前后对照试验,所有受选者给予卡介菌多糖核酸(浙江万马药业有限公司生产,批号:20090105)1.0mg, im qod, 3mo为一个疗程。治疗前后查血常规IL-12,IL-4。
标本采集和检测方法抽取空腹静脉血5ml,取血清于-20℃冰箱保存。人IL-4、IL-12采用双抗体夹心,ABC-酶联免疫吸附实验法,试剂盒购于上海森雄科技实业有限公司,严格按说明书操作,依标准品绘标准曲线,再计算待测样品中细胞因子含量。采用肺功能仪测定FEV1(第1秒钟用力呼气容积)、FET50%(呼气50%用力肺活量时的流速)、PEF(最大呼气峰流速)。
疗效判断标准指病人接受卡介菌多糖核酸治疗3mo时,肺功能各指标好转或正常,无哮喘急性发作,能正常参加体育活动为有效。
统计学方法试验资料用SAS统计软件进行分析,采用t检验和方差分析。
, 百拇医药
结果79例慢性哮喘病人无一例因不良反应或其他原因而中途退出,随访79例病人治疗结束时,完全应答者肺功能各指标均正常,无哮喘急性发作,能正常参加体育活动。有效率为77.2 %,部分应答者肺功能各指标较治疗前明显好转,无哮喘急性发作,能正常参加体育活动,有效率为20.3%,总有效率为97.5%。各组病人治疗前与对照组相比,IL-12下降,IL-4升高,且有统计学差异(P<0.01),但治疗组各组之间治疗前IL-12和IL-4水平无统计学差异(P>0.05),与治疗前比较,完全应答组治疗后IL-12升高,IL-4下降,且治疗后各时间点同治疗前相比均有统计学差异(P<0.05);部分应答组IL-12升高,IL-4降低,两者仅治疗后3mo与治疗前相比有统计学差异(P<0.05),其他各时间点无统计学差异(P>0.05),无应答组IL-12,IL-4治疗后各时间点和治疗前相比均无统计学差异(P>0.05)。见表1。
表1治疗组中不同应答组卡介菌多糖核酸治疗前后白细胞介素12(IL-12)和白细胞介素4(IL-4)水平(x±S,ng•l-1)
, http://www.100md.com
差值-2±11d2±11d
不同应答组治疗前和正常对照组经方差分析,两两比较:CP<0.01,不同应答组治疗前后比较经t检验,dp>0.05,ep<0.05。
讨论卡介菌多糖核酸是我国自行研制生产的一种免疫调节剂,现已广泛应用于自身免疫性疾病,病毒感染性疾病等的治疗,临床观察显示有较强的免疫调节作用[5],对感冒病毒、人乳头瘤病毒等感染也均有良好的预防和治疗作用[5、6]。本研究结果发现:卡介菌多糖核酸组病人临床治愈率明显提高,即使复发,病人病情明显减轻,即复发间隔时间显著延长。提示卡介菌多糖核酸对慢性哮喘具有较好的治疗和预防作用。这可能与卡介菌多糖核酸进入机体后直接刺激单核巨噬细胞系统[7],调节外周血CD4+T细胞细胞因子表达水平密切相关。本研究结果显示:经治疗后,卡介菌多糖核酸组外周血CD4+T细胞IL-12的表达水平极显著提高,而IL-4的表达明显下降,有效改善慢性支气管哮喘病人外周血Th1/Th2的失衡和IL-12水平低下的状态而提高临床疗效和预防复发。在此过程中IL-4继发于IL-12的上升而下调,因此其变化幅度较小。)
, 百拇医药
本研究仅就使用卡介菌多糖核酸1个疗程(3mo)的疗效和免疫学变化进行了研究。如适当延长治疗时间,从理论上讲可能治疗效果会更好,但需要进一步研究证实。
参考文献
1.李国华. 哮喘患者血清SlgE与ECP水平的相关性研究〔J〕. 山东医药.2002,42(19):8.
2.哮喘时IL-10分泌下降,而茶碱通过刺激,TH2细胞使IL-10水平升高,抗炎效果增强. 李小萍. 对茶碱的再认识〔J〕. 中国医院药学杂志. 2005,25(9):870.
3.刘淑红. 茶碱类药物对哮喘患者气道反应性的影响〔J〕.山东医药, 2002,42(19):22.
4.中华医学会呼吸病学分会,支气管哮喘防治指南. 中华结核和呼吸杂志,1997,20(5):26.
, http://www.100md.com
5.肖嵘,李干群. 卡介菌多糖核酸对尖脱湿疣患者的免疫调节作用 及临床疗效〔J〕. 中华皮肤科杂志,2001,34(3):214.
6.常金凤. 卡介菌多糖核酸皮损内注射治疗寻常疣〔J〕.中国新药与临床杂志,2003,22(3):187-189.
7.DENGY, CHEN X, et al . A comparative study on the effect ofBCG-PSN and thymopeptides on T-lymphocyte subsets of normal and immunosuppressed mice〔J〕.J Huazhong Univ Sci Technolog(Med Sci),2003, 23(4):339-343.
(责任审校:韩停), http://www.100md.com(张继兰)
【关键词】 卡介菌多糖核酸;白细胞介素12;白细胞介素4;哮喘
【中图分类号】R562.2+5【文献标识码】 C 【文章编号】1005-0515(2010)005-085-02
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哮喘是以嗜酸粒细胞(EOS)、肥大细胞等多种炎症细胞及细胞因子(CKs)共同参与而引起的气道慢性变态反应性炎症,是患者吸入致敏原后由lgE介导的变态反应性疾病[1]李晓萍[2]在对茶碱的再认识中曾提到哮喘时IL-12分泌下降,而用茶碱后通过刺激TH2细胞使IL-12分泌升高,抗炎效果增强。近年也有研究提示,T淋巴细胞在哮喘发病及气道高反应性(BHR)发生中具有重要作用〔3〕。目前发现哮喘病人存在Th1/Th2细胞因子失衡和IL-12表达低下,卡介菌多糖核酸可通过诱导外周血CD4+T-IL-12表达,下调IL-4表达,纠正病人免疫紊乱而提高临床疗效。因此,测定IL-12,IL-4能大体上了解机体Th应答模式。本文通过检测卡介菌多糖核酸治疗前后病人血清IL-12和IL-4水平的变化,研究血清IL-12,IL-4水平与卡介菌多糖核酸治疗反应之间的关系,以探讨检测血清IL-12和IL-4水平作为卡介菌多糖核酸疗效评价指标的可能性。
病例选择慢性哮喘病人79例,其诊断均符合中华医学会呼吸病学分会制定的标准[4],其中男53例,女26例,年龄42-76岁,病程6mo-7a。受检者治疗前均未行免疫调节治疗。另外,选择31例正常人作为对照,这31例正常人中男性19例,女性12例,年龄45-72岁。
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设计方案和治疗方法本方案采用治疗前后对照试验,所有受选者给予卡介菌多糖核酸(浙江万马药业有限公司生产,批号:20090105)1.0mg, im qod, 3mo为一个疗程。治疗前后查血常规IL-12,IL-4。
标本采集和检测方法抽取空腹静脉血5ml,取血清于-20℃冰箱保存。人IL-4、IL-12采用双抗体夹心,ABC-酶联免疫吸附实验法,试剂盒购于上海森雄科技实业有限公司,严格按说明书操作,依标准品绘标准曲线,再计算待测样品中细胞因子含量。采用肺功能仪测定FEV1(第1秒钟用力呼气容积)、FET50%(呼气50%用力肺活量时的流速)、PEF(最大呼气峰流速)。
疗效判断标准指病人接受卡介菌多糖核酸治疗3mo时,肺功能各指标好转或正常,无哮喘急性发作,能正常参加体育活动为有效。
统计学方法试验资料用SAS统计软件进行分析,采用t检验和方差分析。
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结果79例慢性哮喘病人无一例因不良反应或其他原因而中途退出,随访79例病人治疗结束时,完全应答者肺功能各指标均正常,无哮喘急性发作,能正常参加体育活动。有效率为77.2 %,部分应答者肺功能各指标较治疗前明显好转,无哮喘急性发作,能正常参加体育活动,有效率为20.3%,总有效率为97.5%。各组病人治疗前与对照组相比,IL-12下降,IL-4升高,且有统计学差异(P<0.01),但治疗组各组之间治疗前IL-12和IL-4水平无统计学差异(P>0.05),与治疗前比较,完全应答组治疗后IL-12升高,IL-4下降,且治疗后各时间点同治疗前相比均有统计学差异(P<0.05);部分应答组IL-12升高,IL-4降低,两者仅治疗后3mo与治疗前相比有统计学差异(P<0.05),其他各时间点无统计学差异(P>0.05),无应答组IL-12,IL-4治疗后各时间点和治疗前相比均无统计学差异(P>0.05)。见表1。
表1治疗组中不同应答组卡介菌多糖核酸治疗前后白细胞介素12(IL-12)和白细胞介素4(IL-4)水平(x±S,ng•l-1)
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差值-2±11d2±11d
不同应答组治疗前和正常对照组经方差分析,两两比较:CP<0.01,不同应答组治疗前后比较经t检验,dp>0.05,ep<0.05。
讨论卡介菌多糖核酸是我国自行研制生产的一种免疫调节剂,现已广泛应用于自身免疫性疾病,病毒感染性疾病等的治疗,临床观察显示有较强的免疫调节作用[5],对感冒病毒、人乳头瘤病毒等感染也均有良好的预防和治疗作用[5、6]。本研究结果发现:卡介菌多糖核酸组病人临床治愈率明显提高,即使复发,病人病情明显减轻,即复发间隔时间显著延长。提示卡介菌多糖核酸对慢性哮喘具有较好的治疗和预防作用。这可能与卡介菌多糖核酸进入机体后直接刺激单核巨噬细胞系统[7],调节外周血CD4+T细胞细胞因子表达水平密切相关。本研究结果显示:经治疗后,卡介菌多糖核酸组外周血CD4+T细胞IL-12的表达水平极显著提高,而IL-4的表达明显下降,有效改善慢性支气管哮喘病人外周血Th1/Th2的失衡和IL-12水平低下的状态而提高临床疗效和预防复发。在此过程中IL-4继发于IL-12的上升而下调,因此其变化幅度较小。)
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本研究仅就使用卡介菌多糖核酸1个疗程(3mo)的疗效和免疫学变化进行了研究。如适当延长治疗时间,从理论上讲可能治疗效果会更好,但需要进一步研究证实。
参考文献
1.李国华. 哮喘患者血清SlgE与ECP水平的相关性研究〔J〕. 山东医药.2002,42(19):8.
2.哮喘时IL-10分泌下降,而茶碱通过刺激,TH2细胞使IL-10水平升高,抗炎效果增强. 李小萍. 对茶碱的再认识〔J〕. 中国医院药学杂志. 2005,25(9):870.
3.刘淑红. 茶碱类药物对哮喘患者气道反应性的影响〔J〕.山东医药, 2002,42(19):22.
4.中华医学会呼吸病学分会,支气管哮喘防治指南. 中华结核和呼吸杂志,1997,20(5):26.
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5.肖嵘,李干群. 卡介菌多糖核酸对尖脱湿疣患者的免疫调节作用 及临床疗效〔J〕. 中华皮肤科杂志,2001,34(3):214.
6.常金凤. 卡介菌多糖核酸皮损内注射治疗寻常疣〔J〕.中国新药与临床杂志,2003,22(3):187-189.
7.DENGY, CHEN X, et al . A comparative study on the effect ofBCG-PSN and thymopeptides on T-lymphocyte subsets of normal and immunosuppressed mice〔J〕.J Huazhong Univ Sci Technolog(Med Sci),2003, 23(4):339-343.
(责任审校:韩停), http://www.100md.com(张继兰)
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