对肝素锂与肝素钠抗凝剂的应用评价
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【摘要】目的:探讨肝素锂与肝素钠对全血细胞计数的影响程度。方法:随机采集患者静脉血分装于EDTA-K2,(作标准对照组),肝素锂,肝素钠三种真空采血管中,进行WBC,PLT计数。结果:肝素锂抗凝剂在60分钟内计数WBC,PLT结果无显著差异(P>0.05),肝素钠抗凝剂在同等条件下,结果有显著差异(P<0.05)。结论:肝素锂抗凝剂在短时间内可以作血细胞分析,肝素钠不能作血细胞计数。
【关键词】肝素锂;肝素钠;抗凝剂;血细胞;存放时间
【中图分类号】R826【文献标识码】A【文章编号】1005-0515(2010)009-0005-02
随着全血细胞分析仪的广泛应用,抗凝剂的选择对检测结果相当重要①,EDTA-K2抗凝剂是ICSH推荐的全血细胞分析用抗凝剂②,因此,我们可以把它抗凝的血液所测的结果作为一个参考标准③。由于多种原因,工作中要用到肝素锂与肝素钠,临床医生和护士不甚了解肝素锂与肝素钠的具体用途,出现护士采血拿错抗凝管的现象,时有发生,特别是实习生易出现上述情况。叫护士重新采血,护士不乐意,患者更不乐意,严重影响到医患关系。要杜绝此类事件发生,我们采取了两种克服方法。一是各种抗凝剂的具体用途书写上墙,张贴在显眼的位置;二是只配发EDTA-K2和肝素锂,1:4和1:9的枸橼酸抗凝剂。为什么我们要用肝素锂抗凝剂,而不用肝素钠抗凝剂?下面是我们通过试验的结果,现报道如下。
1 材料与仪器
1.1 3.6mgEDTA-K2血常规真空采血管120支,备用。浙食药监械(准)字2008第2410087号,生产批号081123.
1.2 3.25%肝素锂真空采血管120支,备用。浙食药监械(准)字2007第2410233号,生产批号0806003.
1.3 3.25%肝素钠真空采血管120支,备用。苏食药监械生产许2001-0330,执行标准YZB/苏0775-2007.(准)字2007第2410773. 生产批号090501.
1.4 真空采血针120支,备用。湖北中融达,国食药监械(准)字2008第3150560,执行标准YZB/国0814-2008,批号20090414.
1.5 全血质控品2.0ml。川食药监械(准)字2008第2400081号,执行标准YZB/川0077-2008,批号0509058.四川迈克科技有限责任公司。
1.6 特康Ⅱ型全自动三分群血细胞分析仪1台,赣食药监械(准)字2006第2400108号,产品标准YZB/赣1285-2006,赣食药监械生产许20060029号。
2 方法
2.1 试验对象:随机采取男性血样68例,女性52例,年龄在8~75岁。
2.2 标本的采集与检测:
2.2.1 测试前用做好室内质控,校准仪器。
2.2.2一次抽取患者静脉血2.0ml于EDTA-K2血常规真空采血管,3.0ml于肝素锂真空采血管,3.0ml于肝素钠真空采血管。握在同一只手中,颠倒混匀10次,力度适宜,迅速测定。肝素钠抗凝管先测,依次是肝素锂、EDTA-K2上机测定,上机前都应再次颠倒混匀1~3次。初始测定设定1分钟是相对而言,第2个标本有可能为2分钟,第3个标本有可能为3分钟,因为每次测定的顺序是一样的,所以测定每种抗凝剂标本间隔的时间是一致的。每隔10分钟将上述3个样本重复测定1次,再重复6次测定后,将标本放置室温保存,在2H,3H后再测定1次,最后收集数据资料。120例患者标本都采用上述相同方法测定,分别收集资料。
3 三种抗凝剂部分实验结果 表
3.1 同一标本 WBC结果对照表(1)
3.3 从上面表(1)(2)中可以看出,肝素钠抗凝剂组有一个规律,同一个标本随着存放时间的延长,WBC逐渐增高,(超过2H后又逐渐下降),PLT逐渐下降;肝素锂组WBC上升和PLT下降不大,比较缓慢;EDTA-K2抗凝剂结果比较稳定。各一例标本出现对肝素锂、EDTA-K2依赖性凝集,(除外)。
4.1 将120例标本结果进行统计学处理,肝素钠抗凝剂对WBC的影响,与EDTA-K2对照值最大误差为13.5%,与对照组有显著差异,P<0.05;
4.2 肝素钠抗凝剂对PLT的影响,与EDTA-K2对照值比较,最大误差为45.5%,75%的患者标本存放时间超过30~60分钟,误差在20~30%之间,与对照组有显著差异,P<0.05①③④;
4.3 肝素锂抗凝剂对WBC的影响,与EDTA-K2对照值比较,最大误差为6.8%,90%的患者标本存放时间超过30~60分钟,误差在4~5%,与对照组无显著差异,P>0.05;
4.4 肝素锂抗凝剂对PLT的影响,与EDTA-K2对照值最大误差为7.8%,90%的患者标本存放时间超过30~60分钟,误差在6~7%,与对照组无显著差异,P>0.05。
5 讨论
通过对肝素钠、肝素锂、EDTA-K23种抗凝剂反复对比试验,试验数据表明,肝素钠抗凝剂确实不宜用于全血细胞分析①③④,但是肝素锂抗凝剂在1小时内可以用于全血细胞分析,纠正了“肝素 抗凝剂”不能作为全血细胞分析的错误说法。肝素锂在10分钟内所测得的结果和EDTA-K2所测得的结果几乎完全一致。在多数情况下,肝素锂在10分钟内所测得的结果往往比EDTA-K2所测得的结果高约5%左右,原因是肝素锂是干粉剂型,而EDTA-K2是水剂型,抗凝剂在2.0ml血液中所占比例约5%,是造成误差的 原因。
肝素钠抗凝剂对PLT的影响最大,在1~2小时内,PLT可以下降30~45%,以后不再下降;此时WBC总数可以上升10~15%左右;原因是血小板聚集后通过宝石孔误计为WBC所致④,也符合3个PLT的体积相当于1个WBC的大小,通过制作血片染色,镜下观察证实有30~45%的血小板凝集成团,其余为散在血片中。肝素锂抗凝剂对PLT的影响在前1小时影响不明显,放置在25℃±5℃室温下,3小时内下降都极其缓慢,24小时后逐渐下降20~30%后不再下降。针对肝素锂抗凝剂来说,在这里要强调的是,中、后期测定血样时与混匀力度、方式方法有很大关系,混匀力度大,时间长,解散的PLT相对较多,下降的比例也不符合上述规律,所以要保持测定方法、条件尽量一致。肝素钠、肝素锂对其他如Hb,RBC,HCT,影响较小。为什么肝素钠、肝素锂两种抗凝剂在血细胞分析中存在较大差别?原因可以从化学性质和物理性质这两方面来探讨。钠、锂虽然都是碱金属,但是锂是由两种稳定的同位素Li6和Li7组成,Li的电导率/10E6/cm:0.108,核电荷数3,核外电子层1,锂具有密度小,粘度小,而Li7具有中子俘获面小的优点,仅为钠的6.2%,锂的电子少,相对稳定,所以与PLT结合聚集速度比肝素钠慢。钠的电导率/10E6/cm:0.21,核电荷数11,核外电子层6。从两种元素这3个数值比较,锂比钠的化学性质稳定,钠的核电荷数多,与带负电荷的PLT结合聚集速度比肝素锂快。
肝素是一种含硫酸基团的粘⑤(黏)⑥多糖,可加强抗凝血酶Ⅲ(AT-Ⅲ)(结合),促进其对凝血因子Ⅻ、Ⅺ、Ⅸ、Ⅹ和凝血酶活性的抑制⑥,灭活丝氨酸蛋白酶,从而具有阻止凝血酶形成和抑制血小板聚集等多种作用 ......
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