柔红霉素\盐酸多柔比星和盐酸表柔比星的HPLC分析(2)
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参见附件。
2.7 重现性试验:取柔红霉素、盐酸多柔比星和盐酸表柔比星样品，精密称取6份，每份约1mg，按“2.2”项下方法制备样品溶液，吸取20μL注入液相色谱仪,按上述色谱条件测定。结果，柔红霉素、盐酸多柔比星和表阿霉RSD 均< 10.0 %表明方法重现性良好。
2.8 加样回收率试验:取柔红霉素、盐酸多柔比星和盐酸表柔比星样品5μg各5份，分别加入一定量的水溶解，用旋转蒸发仪40oC蒸馏浓缩，加500μL水洗出，按上述色谱条件测定峰面积，对照线性回归方程计算样品的回收率，结果见表2。
3 讨论
目前，采用HPLC 法分别测定柔红霉素、盐酸多柔比星和盐酸表柔比星文献报道较多，但采用同一个色谱条件来测定这3 种化合物未见报道。本试验发现：Agilent HC-C18柱，柱温30oC，流速1.0mL•min-1，流动相SDS-乙腈-甲醇(500∶500∶60，用磷酸调pH2.2)，检测波长254 nm，3 种化合物分离效果很好。初步分析原因在于三种化合物的结构差异性：盐酸多柔比星比柔红霉素C-14位多了一个羟基，加大了盐酸多柔比星的极性，其保留时间要早于柔红霉素；盐酸表柔比星是盐酸多柔比星结构的异构化，保留时间肯定与盐酸多柔比星不一致。同时用磷酸调pH2.2使呈弱酸性能够提高柱效及分离度。本方法准确、灵敏度高、重现性好、可用于盐酸多柔比星类化合物的定性定量分析，盐酸多柔比星制剂的质量控制。
参考文献
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作者单位：210009 东南大学附属中大医院1
210046 南京师范大学生命科学学院2
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