荧光定量PCR和ELISA检测肝炎病人HBV标志物结果的比较
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目前的定量PCR技术，由于采用了荧光技术和闭管检测，克服了常规PCR易污染的缺点，现用于乙型肝炎病毒的检测，我们采用此方法，对200例住院病人进行了HBV的检测，同时对照ELISA分析其检测结果，现报告如下。
1 材料与方法
1.1 标本来源： 血清标本取自2010年200例住院病人。
1.2仪器： 博日荧光定量PCR检测系统。
1.3HBV ELISA试剂盒：上海科华公司产品按试剂盒说明操作。
1.4 HBV核酸扩增荧光定量检测试剂盒：内含拷贝数分别为：5×107、5×106、5×105、5×104的阳性标准品；HBV临界阳性对照血清；阴性对照血清。(深圳匹基生物技术公司)。
1.5 HBV DNA的检测方法：采用常规碱裂解法从血清中提取HBV DNA[1]。阴性对照、4个梯度标准品、临界阳性对照及各待测样品的反应管放入扩增仪内，按下列条件进行扩增：94℃ 1min预变性，然后按95℃ 5s、60℃ 30s共做40个循环。反应结束后，根据标准曲线分析计算各样品的定量结果。
2 结果
HBV ELISA和荧光定量PCR检测结果见表
3 讨论
ELISA方法的检测结果反映病人体内的HBV感染情况，本组调查病人中，HBsAg、抗HBe、抗HBc阳性的49例中HBV DNA 阳性为20例，而另29例阴性；HBsAg、HBeAg、抗HBc阳性的67例中，HBV DNA全部是阳性；HBsAg、抗HBc阳性的20例中，其中13例阳性，其它7例阴性。HBeAg是HBV病毒复制的指标，因此，在未经过治疗的情况下，HBeAg阳性者HBV DNA的PCR检测也应阳性，同时也发现ELISA检测结果相同的病人，其体内的HBV DNA的复制情况也存在着很大的差别。由此可见临床不能只用ELISA方法检测指标来衡量体内病毒复制的情况，而PCR方法则是检测HBV病毒本身，能更准确灵敏地反映HBV的感染和治疗恢复情况；因此，荧光定量PCR检测结果对临床上评价拉米呋啶或干扰素治疗乙型肝炎疗效有重要价值。
荧光定量PCR及ELISA检测HBV比较表
参考文献
[1] 潘世扬，马晓兰，等，乙肝患者血清中HBV DNA含量的测定及其意义。 临床检验杂志，2000，18(5)：297
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