乙肝两对半与HBVDNA的血清学检测结果分析
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【摘要】目的：为进一步探讨了解乙肝两对半和HBVDNA的关联，有效的控制HBV提高依据。方法：运用荧光定量PCR(FQ-PCR)检测乙肝患者血清中的HBVDNA，同时运用ELISA方法检测HBsAg、抗-HBc、抗-HBs、HBeAg、抗-HBe，并对结果进行相关性分析探讨。结果：本组研究结果中，HBsAg阳性HBVM阴性与HBsAg阳性HBVM阳性HBVDNA检出率相比较两者之间有非常显著的统计学差异(P<0.01)；HBsAg阳性HBVM阴性与HBsAg阴性HBVM阳性HBVDNA检出率相比较两者之间有显著的统计学差异(P<0.05)。结论：HBsAg阳性与HBVDNA复制有密切的关系，对于临床中乙型肝炎的诊断、治疗方案的选择和其疗效考察有很大的指导意义。
【关键词】乙型肝炎；HBVDNA；血清学检测
【中图分类号】R156.3【文献标识码】B【文章编号】1005-0515(2011)12-0226-02
乙型病毒性肝炎是一种严重危害人群健康的全球性传染病，对于乙型肝炎的诊断，目前临床中主要是通过血清免疫学检测及荧光定量PCR检测HBVDNA，是判断患者病程和传染性、治疗及预后的主要依据之一。但由于两对半组合模式的复杂多样性，导致部分患者的HBV感染复制状况难以判断，另一方面HBVDNA虽是乙肝病毒感染和复制的特异性指标，能够强有力的表明其具有传染性[2]，但是因为在严格限制要求的实验室条件下，无法迅速有效的检测出来。笔者通过血清学检测对乙型肝炎患者进行两对半和HBVDNA检查，对其关联性进行分析，现将报道如下。
1资料和方法
1.1标本资料：本次分析研究的对象是我院在2009年10月～2010年10月期间到我院进行体检或是住院治疗时检测出来是乙型肝炎的92例患者。其中，男性48例，女性44例，年龄在3～70岁之间，平均年龄为34.2岁。
1.2仪器和试剂：本次研究中HBsAg定量检测所使用的仪器是由美国雅培公司生产的i2000免疫发光检测系统，诊断时所使用的试剂也均是由此公司提供的；HBVDNA检测仪是由美国PerkinElmer公司提供的PE7000自动荧光PCR仪，FQ-PCR试剂盒的灵敏度为200copies/ml，是由中山大学提供；ELISA诊断试剂盒是由上海荣盛生物技术有限公司提供。
1.3检测方法：空腹静脉采血2.0ml，分离血清，采用ELISA方法检测HBsAg、抗-HBc、抗-HBs、HBeAg、抗-HBe。稀释血清标本，严格按照说明书进行操作，测HBsAg含量，单位是IU/ml。
1.4数据处理：将检测得到的数据进行对数转换，并通过SPSS13.0的统计学软件包进行处理，计算t值和卡方值，P<0.05为有显著的统计学差异，P<0.01表示为有非常显著的统计学差异。
2结果
2.1HBVM与HBVDNA检测结果：血清HBVM(ELISA)和HBVDNA阳性(PCR)检测结果中有几种模式，包括HBsAg、抗-HBs、HBsAg+HBeAg、HBsAg+HBeAg+抗-HBc、HBsAg+HBeAg+抗-HBc+抗-HBs、HBsAg+HBeAg+抗-HBe+抗-HBs、HBsAg+HBeAg+抗-HBs、HBsAg+抗-HBc+抗-HBe、HBsAg+抗-HBc、抗-HBc+抗-HBe、抗-HBe、抗-HBc几种。
2.2HBsAg与其他乙肝感染标志物比较：HBsAg阳性HBVM阴性与HBsAg阳性HBVM阳性HBVDNA检出率相比较两者之间有非常显著的统计学差异(P<0.01)；HBsAg阳性HBVM阴性与HBsAg阴性HBVM阳性HBVDNA检出率相比较两者之间有显著的统计学差异(P<0.05)。
3讨论
FQ-PCR是临床中用于基因诊断较为有效的手段之一，其检测是采用完全闭合性管，因为其之后不需要PCR处理，因此在很大程度上避免了交叉感染；同时可以采用实时的检测技术，所得Ct值和原始模板数量完全呈线性相关，定量准确率很高[3]。其与普通的PCR相比较具有灵敏度高的特点，而且由于其应用荧光探针，可以通过光电传导系统直接探测PCR在扩增过程中荧光信号的变化从而获得定量结果，具有光谱的高精确性和DNA杂交的高特异性。
乙肝“两对半”是目前国内最常用的乙肝病毒(HBV)感染后检测血清标志物，包括5项内容的指标，即乙肝表面抗原(HBsAg)、乙肝表面抗体(抗-HBs)、乙肝e抗原(HBeAg)、乙肝e抗体(抗-HBe)和乙肝核心抗体(抗-HBc)。因为绝大部分的HBV感染者只是携带者，同样会产生免疫应答，得到不同的“两对半”模式。因此，从根本上讲“两对半”结果的阳性，只能反映感染了HBV，与临床病情轻重无关 ......
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