中药复方肠胃清含药血清对胃癌SGC7901细胞凋亡的影响(2)
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2.6 RT-PCR法检测SGC7901细胞Bcl-2、Bax、P53基因表达
提取肿瘤细胞总RNA,用RT-PCR方法检测肿瘤细胞Bcl-2、Bax、P53 mRNA表达。Bcl-2、Bax、P53引物序列见表1。反应条件:94 ℃预变性5 min;变性3 min(95 ℃),退火30 s (58 ℃),延伸1 min(72 ℃),共30个循环,最后72 ℃延伸7 min。经凝胶成像系统分析,分别计算Bcl-2、Bax及P53与内参扩增带荧光强度。每组重复实验3次。
3 统计学方法
4 结果
4.1 肠胃清药物血清对人胃癌SGC7901细胞增殖的影响
药物干预48 h后,正常血清不同浓度组(0%、2.5%、5%、7.5%、10%、20%)OD值分别为1.00±0.07、0.98±0.02、0.95±0.04、0.95±0.03、0.92±0.04、0.92±0.04;而肠胃清药物血清不同浓度组(0%、2.5%、5%、7.5%、10%、20%)OD值分别为1.00±0.10、0.96±0.08、0.86±0.09、0.84±0.07、0.76±0.07、0.72±0.07,从5%浓度组开始,OD值小于正常组,尤其以10%和20%组下降为甚。其细胞存活率分别为76%、72%,同正常血清组比较差异有统计学意义(P<0.05)。
4.2 肠胃清药物血清对人胃癌SGC7901细胞凋亡的影响
人胃癌SGC7901细胞经不同处理48 h后,与对照组比较,低剂量组无明显变化(P>0.05),中、高剂量凋亡指数升高,分别为11.29±0.18、17.05±0.83,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05);5-Fu组及5-Fu联合组凋亡率分别为27.72±4.32、55.93±17.93,与对照组、低剂量组比较差异均有统计学意义(P<0.01)。
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