复方苦参注射液对人子宫内膜癌细胞HEC—1B雌激素受体表达的影响(2)
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参见附件。
反应结束后以含有Gold ViewTM核酸染料的1.5%琼脂糖凝胶电泳。在紫外光凝胶成像分析系统下摄片,以ER-α36,ER-α66基因片段与GAPDH片段灰度值的比值作为其相应表达水平数值。实验重复3次。
3 统计学方法
4 结果
4.1 对细胞增殖的影响
结果表明,经过不同浓度的药物处理48、72 h后对HEC-1B细胞的影响不同。低浓度复方苦参注射液及苦参注射液有轻微的促进细胞增殖作用,但各给药组与空白对照组比较差异无统计学意义(P>0.05);高浓度的上述药物对细胞的增殖有明显的抑制作用(P<0.05);白土苓注射液对细胞增殖无影响;顺铂表现出一定的抑制作用。各给药组的细胞抑制率见图1。
4.2 对雌激素受体-α36及雌激素受体-α66 mRNA的影响
从PCR扩增结果看,复方苦参注射液、苦参注射液、顺铂注射液作用于HEC-1B细胞48 h后,与空白对照组相比,细胞中ER-α36 mRNA表达水平均明显降低(P<0.05);除白土苓组外,其他各给药组ERα-66mRNA表达水平亦明显降低(P<0.05)。见图2、图3。
5 讨论
ER是一类由配体激活的核转录因子,介导大部分的雌激素反应。生物体内的雌激素通过与ER结合,传递细胞生长的信号,对靶器官组织的肿瘤形成产生影响[4-5]。
已知ER至少包括ER-α和ER-β2种亚型。传统认为ER-α蛋白由595个氨基酸组成,分子质量为66 kD,称为ER-α66。最近发现雌激素受体ER-α还有一个亚型,分子质量为35.7 kD,被命名为ER-α36[6]。ER-α36与ER-α66不同之处在于ER-α36缺乏2个转录激活功能区AF-1和AF-2,却仍然保留着DNA结合区和部分配基结合区[7]。其独特的结构行使着与传统的ER不同的生物学效应 ......
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