滋补脾阴方药对脾阴虚糖尿病大鼠大脑皮质内质网应激的影响(2)
 |
| 第1页 |
参见附件。
1.6 RT-PCR观察各组大鼠葡萄糖调节蛋白78基因表达变化
以提取的RNA为模板合成cDNA，反应体系：总RNA 2 μg，Oligo(dt)12-18 primer 0.5 μL，以DEPC水补足体积到9 μL，70 ℃水浴10 min，置于冰上。加入5×First-Strand Buffer 5.875 μL，0.1 mol/L DTT 2 μL和10 mmol/L dNTP混合物2 μL，RNaseOUT 0.5 μL， Reverse transcriptase 0.125 μL，总体积为20 μL， 46 ℃水浴1.5 h，70 ℃水浴15 min后置于冰上5 min， -20 ℃保存备用。引物合成委托Takara公司完成。GRP78(348 bp)包括正义链5'-GTTCTGCTTGATGTGTG TCC-3'和反义链5'-TTTGGTCATTGGTGATGGTG-3'，β- actin(241 bp)包括正义链5'-AACCCTAAGGCCAACCGT GAAAAG-3'和反义链5'-TCATGAGGTAGTCTGTCAG-3’。以cDNA为模板进行PCR扩增，反应体系见表1。蛋白表达条带采用Bandscan软件进行分析，将GRP78 mRNA的IOD值与所对应样品的β-actin的IOD值进行比较，分析GRP78 mRNA表达水平。
1.7 统计学方法
采用SPSS13.0统计软件进行分析。所有实验数据用—x±s表示，多组间均数比较采用方差分析。P<0.05表示差异有统计学意义。
2 结果
2.1 滋补脾阴方药对大鼠大脑皮质蛋白激酶样内质网激酶、真核起始因子2α-亚单位、葡萄糖调节蛋白78、磷酸化-真核起始因子2α-亚单位蛋白表达的影响
实验结果表明 ......
您现在查看是摘要介绍页，详见PDF附件。