竹节参总提物对D-半乳糖致衰老小鼠的影响(2)
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参见附件。
1.3仪器
MT-200水迷宫,成都泰盟科技有限公司；XW-80A微型旋涡混合仪,上海沪西分析仪器厂有限公司；JA2003型电子分析天平,上海天平仪器厂；LDZ5-2型自动平衡离心机,北京医用离心机厂；WFZ UV-2100型紫外可见分光光度计,尤尼柯上海仪器有限公司；PK-600S型水浴锅,上海精宏实验设备有限公司；9902型PCR扩增仪,新加坡AB Applied Biosystems；Gene Genius 凝胶分析系统,英国Syngne公司；165-1801型PCR仪,美国Bio-Rad。
2实验方法
2.1竹节参提取物的制备
将竹节参干燥根茎粉碎后,用60%乙醇回流提取3次后,回收乙醇,合并滤液,浓缩,得到竹节参提取物,提取率为25.8%。
2.2分组、造模与给药
将昆明种小鼠随机分为正常组、模型组、竹节参低剂量组、竹节参高剂量组和维生素E组。正常组颈背部皮下注射生理盐水,其他各组均皮下注射D-半乳糖(150 mg/kg)进行造模。竹节参低、高剂量组同时灌胃竹节参提取物(150、300 mg/kg),相当于临床成人用量的50、100倍；维生素E组200 mg/kg灌胃维生素E；正常组和模型组给予等量生理盐水灌胃。每组给药体积0.1 mL/mg,每日1次,连续8周。
2.3Morris水迷宫实验
造模第8周进行水迷宫测试。迷宫水池高50 cm,直径120 cm,站台直径10 cm,平台距水面1.5 cm,壁上标有A、B、C、D 4个入水点,将水迷宫等分成4个象限。实验前,每只小鼠随机入水,寻找平台,若小鼠120 s内未找到平台,由实验者引导至平台,停留20 s。正式实验时,每次从同一个点将试验小鼠放入水迷宫中,若动物2 min尚未找到站台,将动物拿到站台上并使其停留20 s,连续5 d ......
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