甘露消毒丹抗肠道病毒71型作用的体外实验研究(2)
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2.3.2 治疗性抑毒实验 前期步骤同“2.3.1”项。在长成单层细胞的96孔培养板上，每孔接种50 μL病毒液，轻摇混匀，35 ℃吸附1.5 h后，吸弃病毒液，分别加入甘露消毒丹、病毒唑药液及维持液各50 μL，各设4个复孔，每孔均设正常细胞对照、病毒对照(只接种病毒液，吸附1.5 h后吸弃病毒液，加入维持液，不加药液)。继续培养，余步骤同“2.3.1”项。
2.3.3 预防性抑毒实验 前期步骤同“2.3.1”项。细胞长成单层，吸弃培养液。每孔细胞预先加入甘露消毒丹、病毒唑药液及维持液各50 μL，各设4个复孔，作用12 h后，吸弃孔内液体，加入50 μL病毒液，轻摇混匀，1.5 h后吸弃病毒液，加入100 μL维持液。同时每孔设正常细胞对照、病毒对照。继续培养，余步骤同“2.3.1”项。
2.3.4 预防+治疗抑毒实验 前期步骤同“2.3.1”项。细胞长成单层，吸弃培养液。每孔细胞预先加入甘露消毒丹、病毒唑药液及维持液各50 μL，各设4个复孔，作用12 h后，吸弃孔内液体，加入50 μL病毒液，轻摇混匀，1.5 h后吸弃病毒液，再次加入50 μL药液和维持液。同时每孔设正常细胞对照、病毒对照。继续培养，余步骤同“2.3.1”项。
3 结果
3.1 甘露消毒丹对病毒毒力的影响
以超过50%细胞出现CPE为阳性判断标准进行观察，见表1。根据Reed-Muench法计算得出TCID50=10-2.89/mL。
3.2 甘露消毒丹对药物细胞毒性的影响
根据各药不同浓度的OD值，以药物浓度(g/mL)为横坐标、细胞存活率(%)为纵坐标绘出非线性回归曲线，见图1。从回归曲线获得90%细胞存活率浓度甘露消毒丹为10-2.43=0.003 7 g/mL、病毒唑为10-3.19=0.64 mg/mL。
3.3 甘露消毒丹对肠道病毒71型的影响
根据病毒抑制率计算公式，计算甘露消毒丹、病毒唑对EV71的病毒抑制率 ......
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