当归不同有效部位对高原低氧模型小鼠免疫功能的影响(3)
2.2.4 细胞杀伤活性检测 脾淋巴细胞悬液的制备方法同“2.2.2”项,参照文献[8]分别以脾淋巴细胞(脾细胞浓度为2×107/mL)和K562细胞浓度为1×106/mL作为效应细胞和靶细胞,再分别设置实验组和对照组。实验组每孔加入50 ?L K562细胞悬液,培养1 h,然后向每孔加入50 ?L效应细胞悬液(脾细胞),每个样本至少做4个复孔。靶细胞组每孔加入50 ?L K562细胞悬液,培养1 h,靶细胞对照孔加50 ?L完全RPMI1640。放入37 ℃、5%CO2的饱和水蒸汽培养箱培养20 h后每孔加入10 ?L MTT(终浓度为5 mg/mL),继续培养4 h,离心弃上清后每孔加入100 ?L三联裂解液,振荡混匀。于酶标仪波长570 nm处读取各孔吸光度(A)值。计算NK杀伤率[(靶细胞A值-实验组A值)÷靶细胞A值×100%]。2.2.5 血清白细胞介素-2检测 眼球取血,室温静置2 h后,3000 r/min离心5 min,用微量加样枪吸取血清,按照ELISA试剂盒说明书操作 ......
您现在查看是摘要页,全文长 4064 字符。