1 材料与方法

    1.1 细胞株及细胞培养

    HCT116人结肠癌细胞株购自中国科学院上海生命科学研究院细胞库。培养条件为37 ℃、5%CO2；培养基为含10%胎牛血清、100 U/mL青霉素和100 μg/mL链霉素的McCoy's 5A培养基；用含0.01%EDTA的0.25%胰酶进行消化传代，待细胞处于对数生长期后，用于实验。

    1.2 药物

    桑根白皮素对照品(纯度99%)，购自上海中医药标准化研究中心，溶于二甲基亚砜(DMSO)中制备保存液，浓度为4800 μmol/L，储存于-20 ℃备用。

    1.3 主要试剂与仪器

    胎牛血清(奥地利PAA Laboratories GmbH公司)；CCK-8试剂(日本Dojindo公司)；兔抗人β-catenin一抗、兔抗人GSK-3β一抗、兔抗人c-Myc一抗(美国CST公司)；McCoy’s 5A培养基(GIBCO公司)；鼠抗人β-actin一抗、HRP(辣根过氧化物酶)标记的羊抗鼠IgG二抗、HRP标记的羊抗兔IgG二抗(美国Proteintech公司)；鼠抗人cyclinD1一抗、兔抗人cyclinB1一抗(美国Signalway Antibody公司)；RIPA裂解液、BCA试剂盒(碧云天公司)；ECL发光试剂盒、CO2培养箱(美国Thermo Scientific公司)；TUNEL细胞凋亡原位检测试剂盒(南京凯基生物公司)；Steril Gard超净工作台(美国Baker公司)；Model 550酶标仪、Model Universal Hood Ⅱ凝胶成像系统(美国Bio-Rad公司)；FACS Calibur 流式细胞仪(美国BD公司) ......