2.7.3 总RNA反转录 反应体系为20 ?L，总RNA量为100 ng，建立反转录反应体系。试剂确定为5×PrimeScript RT Master Mix、总RNA、Rnase Free dH2O，加入量分别为4、4、12 ?L，反转录反应条件为37 ℃、15 min，85 ℃、5 s，冷却至4 ℃。然后混匀并离心，进行反转录反应为cDNA。

    2.7.4 RT-PCR检测各组目标基因表达水平 取反转录完成的cDNA，专用SYBR Green荧光染料， RNase-free灭菌水和目的基因引物，引物序列如下：β-actin上游引物5'-AATTACTCCCTCTCCTA-3'，下游引物5'-ACTCATCTACTCCTCTTCT-3'；PI-3K上游引物5'-ACTCCTAAGCCATTAAA-3'，下游引物5'-ATCCAATA CTTTA-3’；GLUT4上游引物5'-TTGCAGTGCCTGAGTC TTCTT-3' ......