实时荧光定量PCR检测心肌组织HIF-1α基因表达。称取100 mg心肌组织，Trizol提取组织总RNA。制胶，上样，RNA琼脂糖凝胶电泳。按照promega试剂盒说明合成cDNA。结束后取合成产物进一步进行实时荧光定量检测。PCR反应管中依次加入试剂，并混匀25 ?L体系。上机检测，条件如下：预变性95 ℃、2 min，变性95 ℃、15 s，退火58 ℃、45 s，延伸60 ℃、1 min。45个循环，PCR完成后进行融解曲线和扩增曲线分析，利用系统软件计算各样本Ct值，并用Relative Expression Software Tool(REST version 2009)软件分析数据，进行组间比较。引物与目的基因序列：β-actin-F：5'-CATCCGTAAAGACCTCTATGCCAAC-3'； β-actin-R：5'-ATGGAGCCACCGATCCACA-3'，扩增产物长度171 bp；HIF-1α-F：5'-GGACGATGAACATCAAGCA-3'；HIF-1α-R：5'-AGGAAT GGGTTCACAAATCAGCA-3' ......