1.3 造模与分组

    采用2VO大鼠复制VD模型[6]，另随机取12只大鼠作为假手术组，假手术组手术过程与造模一致，但双侧颈总动脉不结扎。造模成功大鼠随机分为模型组、针刺组和非穴组，每组12只。

    1.4 干预

    针刺组和非穴组于造模后3 d针刺治疗，其中针刺组选取“百会”和双侧“足三里”捻转补法各30 s，之后不留针，取穴位置参照文献[7]，非穴组参照文献[8-9]取常用非穴点(双胁肋下髂棘直上10 mm)行无行针手法的浅刺不留针。以上治疗每日1次，连续6 d休息1 d，共12次。另外假手术组、模型组和非穴组进行与针刺组相同时间和手法的捉抓刺激。

    1.5 取材及处理

    末次针刺后第2日，大鼠腹腔注射2.5%戊巴比妥钠(0.2 mL/100 g)麻醉，每组取5只大鼠4%多聚甲醛固定，并取出全脑，蔗糖梯度脱水后冰冻切片(厚度10 μm)；剩余大鼠直接断头后分离前额叶皮层，-80 ℃冰箱保存。

    1.6 神经元损伤检测

    将切片置于50 ℃焦油紫染色液中孵育45 min ......