山楂叶原花青素对肿瘤坏死因子—α诱导人脐静脉内皮细胞细胞间黏附分子—1和E—选择素过表达的影响(2)
1.2 药物及制备山楂叶原花青素,本院实验中心参照文献[4]方法制备。6倍体积60%乙醇加热山楂叶1 h,过滤,取滤液,回收至无醇味。经AB8树脂吸附,水洗至清。70%乙醇洗脱树脂至无色,收集洗出液,回收至无醇味。加氯仿萃取2次,去除叶绿素,聚酰胺吸附,烘干。
1.3 試剂
原花青素标准品(纯度>95%,沃玛特公司,4852-22-6),Ⅰ型胶原酶(Gibco公司,17100-017),胰酶(Amesco公司,0458),内皮细胞培养基(M200-500)及其添加物(S003-10),Cascade公司。重组人TNF-α(CytoLab公司,300-01A),藻红蛋白(PE)标记小鼠单克隆抗人ICAM-1荧光抗体(BD公司,347977),异硫氰酸荧光素(FITC)标记小鼠单克隆抗人E-选择素荧光抗体(R&D公司,BBA21),PE标记小鼠IgG2a(BD公司,349053),FITC标记小鼠IgG1(R&D公司 ......
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