取肺组织100 mg放入去核酶试管内，加3 mL预冷Trizol液，超声匀浆60 s，按Trizol说明书进行操作，选取RNA，检测IL-6和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)RNA浓度。cDNA合成：5×PrimeScript RT Master Mix 2 μL，总RNA(250 ng/μL)2 μL，加RNase Free dH2O至总体积为10 μL，混合后37 ℃ 15 min、85 ℃ 5 s反转录，进行PCR扩增。引物序列见表1。反应体系总体积为20 μL：SYBR Premix Ex Taq 10 μL，PCR Forward Primer(10 μmol/L)0.4 μL，PCR Reverse Primer(10 μmol/L)0.4 μL，Template(<100 ng)2 μL，dH2O(sterile distilled water)7.2 μL。扩增条件：预变性95 ℃ 30 s，变性95 ℃ 5 s，退火及延伸60 ℃ 30 s，40 cycles。用相对定量2-ΔΔCT法计算各基因的相对表达量。

    3 统计学方法

    采用SPSS10.0统计软件进行分析 ......