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编号:13228670
大黄酸兔源多克隆抗血清的制备与鉴定(1)
http://www.100md.com 2018年5月1日 《中国中医药信息杂志》 2018年第5期
大黄酸兔源多克隆抗血清的制备与鉴定,人工抗原,碳二亚胺法,兔源多抗血清,酶联免疫分析
     摘要:目的 合成大黃酸人工抗原,制备敏感性高、特异性强的大黄酸兔源多克隆抗血清。方法 采用碳二亚胺法制备大黄酸人工抗原,将大黄酸分别与牛血清白蛋白和卵清蛋白相偶联。用紫外扫描法鉴定大黄酸人工抗原是否偶联成功,免疫新西兰兔,制备多抗血清,通过间接竞争ELISA测定抗血清效价,通过间接竞争ELISA鉴定抗血清的敏感性和特异性,并分别用间接竞争ELISA和HPLC检测大黄中大黄酸的含量。结果 2只新西兰兔产生的多抗血清效价在1∶64 000以上,其中,2号兔多抗血清敏感性最好,半数抑制浓度为0.09 ng/mL,且具有良好的特异性。兔抗血清测得大黄中大黄酸含量为(0.026±0.001)%,HPLC测得大黄中大黄酸含量为(0.027±0.000)% ......
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