补肾健脾方对人结肠癌移植瘤生长及血清血管内皮生长因子和基质金属蛋白酶7表达的影响(2)
1 实验材料1.1 细胞株与动物
人结肠癌细胞株LoVo,上海博谷生物有限公司。雄性BALB/c裸鼠80只,SPF级,4~6周龄,体质量18~20 g,上海斯莱克实验动物有限责任公司,动物许可证号SCXK(沪)2016-0019。饲养于上海中医药大学SPF级实验动物中心。
1.2 药物
补肾健脾方由黄芪、白术、女贞子、肉苁蓉、野葡萄藤、石见穿、八月札组成,其提取物由上海医药工业研究院制备及质量控制。
1.3 主要试剂与仪器
F12K培养基及胎牛血清,美国Gibco公司;5-氟尿嘧啶(5-FU),上海旭东海普药业有限公司;人血管内皮生长因子(VEGF)、人基质金属蛋白酶7(MMP-7)ELISA试剂盒,上海博谷生物科技有限公司。双人垂直流超净工作台(新加坡ESCO),台式低速离心机(德国Eppendorf),荧光倒置显微镜(日本OLMYPUS),CO2培养箱(英国RSBiotech)。
2 实验方法
2.1 细胞培养
F12K培养基(10%胎牛血清、1.5 g/L碳酸氢钠、1.5 mmol/L L-谷氨酰胺)培养人结肠癌LoVo细胞 ......
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