毓麟珠对早发性卵巢功能不全模型小鼠卵巢形态、卵泡发育及mTO

毓麟珠对早发性卵巢功能不全模型小鼠卵巢形态、卵泡发育及mTOR信号通路的影响(3)

http://www.100md.com 2018年10月1日《中国中医药信息杂志》 2018年第10期

毓麟珠对早发性卵巢功能不全模型小鼠卵巢形态、卵泡发育及mTOR信号通路的影响,3统计学方法,4结果,5讨论

     提取小鼠卵巢组织蛋白，测定蛋白浓度，进行SDS-PAGE，然后转膜。将PVDF膜以3%BSA 37 ℃封闭1 h，再分别用AKT和mTOR兔抗鼠多克隆抗体(1∶200)37 ℃孵育1.5 h，洗膜，加ALP标记的山羊抗兔IgG(1∶500)37 ℃孵育1 h。然后加NBT/BCIP避光显色。以β-actin作为内参照，应用IPP6.0软件分析。

    2.8 实时荧光定量PCR检测卵巢组织Rheb、S6k1、4E-BP1 mRNA表达

    按照常规方法提取小鼠卵巢组织RNA，提取后RNA进行浓度测定，使用2 μg RNA进行反转录，体系为50 μL。反应结束后，进行RT-PCR反应，反应结束后，分析Ct值，以GAPDH为内参照，采用2^-^ΔΔ^Ct法分析。

    3 统计学方法

    采用SPSS17.0统计软件进行分析。实验数据以x(—)±s表示，数据先做正态分布检验。若符合正态分布，组间差异比较采用方差分析 ......

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