扶正解毒化瘀方总苷提取物对呼吸道合胞病毒感染宿主细胞炎性反应的影响(3)
精密吸取给药前后血浆样品100 μL,加乙腈沉淀蛋白1 mL,涡旋3 min,14 000 r/min离心20 min,移取有机层,氮气吹干,残渣加100 μL甲醇复溶,涡旋2 min,14 000 r/min离心10 min,取上清液置于液相瓶,进样10 μL,行LC-MS/MS测定,平行3份。色谱条件:采用ACQUITY UPLCTM BEH C18色谱柱(100 mm×2.1 mm,1.7 μm);流速:0.2 mL/min;进样量:10 μL;流动相:0.1%甲酸水-甲醇;运行时间:0~45 min;分辨率:70 000;最大离子注入时间:150 ms;扫描范围:100~1500 m/z阴性。
2.6 细胞炎性因子检测
采用ELISA檢测各实验组细胞上清液炎性因子IL-1β、IL-8、IFN-α、TLR3、TLR7的表达。严格按试剂盒说明书进行操作。
3 统计学方法
采用SPSS17.0统计软件进行分析。实验数据以—x±s表示,组间比较采用方差分析 ......
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