1.5 标本制备

    给药干预28 d，大鼠麻醉，腹主动脉采血，静置2 h后离心取血清，置于-80 ℃冰箱保存，待测。处死大鼠，取右肺组织，立即置于液氮中冷冻，后转移至-80 ℃冰箱保存。取左肺，用于组织病理切片检测。

    1.6 指标检测

    1.6.1 大鼠肺组织病理形态观察

    取大鼠左肺组织，置于4%甲醛溶液中固定24 h，常规乙醇梯度脱水、石蜡包埋、切片，HE染色，光镜下观察肺组织病理改变。

    1.6.2 ELISA检测血清组织基质金属蛋白酶9及金属蛋白酶抑制剂1水平

    按ELISA试剂盒说明书进行操作。

    1.6.3 Q-PCR检测组织基质金属蛋白酶9及金属蛋白酶抑制剂1基因表达

    取肺组织100 mg于1.5 mL无酶EP管中，加入1 mL预冷Trizol液，剪碎组织块，匀浆60 s，采用酚/氯仿萃取法提取总RNA，微量核酸蛋白检测仪测定 RNA的纯度和浓度 ......