2.3 活血散结方药物血浆干预视网膜色素上皮细胞增殖测定

    选取第4代体外培养兔RPE细胞，分为空白对照组(DMEM)，正常血浆组(正常血浆)及5%、10%、20%、40%、60%、80%、100%药物血浆组(取血浆样本，按体积比1∶2加入纯甲醇，涡旋混合10 min，12 000 r/min离心10 min，取上清液，40 ℃氮气吹干，成冻干粉。用培养基溶分别溶解成7个浓度药物血浆。96孔板培养板培养，每组各设5个复孔。采用CCK-8法检测兔RPE细胞活力。取对数生长期兔RPE细胞，用培养基配成细胞悬液并调整细胞密度至50个/μL，每孔(96孔板培养板)加入100 μL，铺板后用PBS填充边缘孔。置于培养箱，5%CO₂、37 ℃孵育，待细胞单层铺满孔底，加入用无血清培养基配制的不同浓度的药物血浆，每孔总体积为200 μL。培养48 h后，每孔加10 μL 7sea-cell counting kit。继续培养2 h后，应用酶标仪检测450 nm处的吸光度(OD)。記录结果 ......