收集上述培养的细胞，加1 mL Trizol，按说明书流程提取RNA，以Nanodrop分光光度计测定RNA浓度。随后使用Promega反转录试剂盒，按照试剂盒说明书将RNA反转录为cDNA，然后，按20 μL体系[2×PCR buffer 10 μL、cDNA 1 μL、上下游引物各1 μL(見表1)、ddH₂O 7 μL]进行PCR扩增，操作步骤：95 ℃、5 min，95 ℃、30 s，47 ℃、0 s(β-actin)，57 ℃、30 s(ACC)，61 ℃、30 s(FAS)，55 ℃、30 s(GPAT)，55 ℃、30 s(SCD)，72 ℃、30 s，30个循环;72 ℃、10 min。1%琼脂糖凝胶电泳对PCR产物进行检测，紫外透视分光仪观察。

    1.9 统计学方法

    采用GraphPad Prism 5 Demo软件进行分析。实验数据以x(—)±s表示，组间比较采用student-t检验 ......