小儿开胃增食合剂对厌食症幼龄大鼠胃窦组织生长素、血管活性肠肽及其受体表达的影响(3)
1.7 Western blot检测大鼠胃窦组织生长素、血管活性肠肽及其受体蛋白表达取大鼠胃窦组织,加1 mL蛋白裂解液RIPA,提取总蛋白。收集含有裂解液细胞,4 ℃、12 000 r/min离心30 min,收集上清液,BCA法测定蛋白浓度。根据蛋白定量结果,每孔加40 ?g目的蛋白;加入电泳液,并进行组织蛋白电泳,转PVDF膜,根据目的蛋白选择相应的条带,5%脱脂奶粉室温封闭2 h,洗膜后,加入稀释后的一抗4 ℃孵育,过夜;再加二抗室温孵育2 h,曝光,所得图片采用ImagePro Plus 6.0软件进行扫描,利用GAPDH校准后计算其灰度值。
1.8 统计学方法
采用SPSS21.0统计软件进行分析。实验数据以x(—)±s表示,两组间比较采用t检验,多组间比较采用方差分析,方差齐采用LSD检验法,方差不齐用Games-Howell检验法。P<0.05表示差异有统计学意义。
2 结果
2.1 模型评定标准
2.1.1 大鼠摄食量变化
造模第1日 ......
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