2.4 肝癌HepG2细胞增殖测定

    以抑制SMMC-7721细胞增殖的复方IC50和组分作用于HepG2细胞24、48 h，MTT法检测其对HepG2细胞增殖的抑制作用。

    2.5 实时荧光定量PCR检测相关基因表达

    选择对数生长期SMMC-7721和HepG2细胞，常规消化后接种至6孔板，每孔3×105个细胞。按处理因素不同，设置对照组、复方组、组分组，分别给予0.1%DMSO、复方(0.86 mg/mL，含0.1%DMSO)和组分(小檗碱、大黄素、桂皮醛终浓度分别为44、23、46 μmol/L，含0.1%DMSO)。给药24 h后，吸弃培养液，收集细胞，Trizol法提取总RNA，并用Prime Script RT reagent Kit将mRNA反转录成cDNA，反应条件：37 ℃、15 min，85 ℃、5 s。cDNA用SYBR Premix试剂进行实时荧光定量PCR，扩增条件：95 ℃、3 min;95 ℃、30 s ......