张秋艳，黄松丽，张琳婧，梁羽茜，赵丕文，魏胜利，胡秀华

    论著·实验研究

    黄芪和天花粉对小鼠恶性黑色素瘤B16细胞增殖和迁移及E-cadherin、N-cadherin蛋白表达的影响

    张秋艳，黄松丽，张琳婧，梁羽茜，赵丕文，魏胜利，胡秀华

    北京中医药大学，北京 100029

    观察黄芪、天花粉及其配伍对小鼠恶性黑色素瘤B16细胞增殖和迁移的影响，探讨其作用机制。MTT法检测B16细胞增殖，根据结果计算细胞生长抑制率为0%时对应的各药物浓度(IC0)、为25%时对应的各药物浓度(IC25)、为50%时对应的各药物浓度(IC50)。设空白组、配伍组(黄芪注射液IC0+天花粉水煎剂IC0、黄芪注射液IC0+天花粉水煎剂IC25、黄芪注射液IC0+天花粉水煎剂IC50、黄芪注射液IC25+天花粉水煎剂IC0、黄芪注射液IC25+天花粉水煎剂IC25)。细胞划痕实验检测B16细胞迁移，Western blot检测B16细胞迁移相关蛋白E-cadherin、N-cadherin表达。MTT检测结果表明，不同剂量黄芪和天花粉均可抑制B16细胞增殖，具有浓度依赖性；细胞划痕实验结果显示，黄芪和天花粉均影响B16细胞划痕愈合，抑制细胞迁移，具有浓度依赖性；两药不同比例配伍的细胞增殖抑制率明显高于单味中药，差异有统计学意义(<0.05)；Western blot检测结果显示，黄芪和天花粉均增加E-cadherin蛋白的表达，降低N-cadherin蛋白的表达。黄芪、天花粉及其配伍均可抑制小鼠恶性黑色素瘤B16细胞增殖及迁移，且两药配伍效果优于单味中药，黄芪和天花粉抑制细胞迁移的机制与E-cadherin和N-cadherin蛋白的表达相关。

    黄芪；天花粉；B16细胞；细胞增殖；细胞迁移；配伍

    恶性黑色素瘤起源于黑色素细胞的异常增生，是一种发病率高、恶性程度高、发展速度快、死亡率高的恶性肿瘤，浸润和迁移能力强，早期即可向其他部位发生转移，手术后极易复发。因此，如何有效防治黑色素瘤侵袭和转移，促进其细胞凋亡，是目前临床治疗恶性黑色素瘤关注的重点。黄芪和天花粉首载于《神农本草经》，黄芪有补气升阳、托毒生肌等功效，其主要成分黄芪多糖能减轻中波紫外线照射对皮肤角质形成细胞的损伤[1]。天花粉有清热泻火、生津止渴、消肿排脓功效，应用于多种外科疾病的治疗。临床及实验研究显示，黄芪和天花粉均有抗炎、抗病毒、抗肿瘤活性，用于多种癌症的治疗[2-8]。此外，中医古籍也有黄芪和天花粉联合应用的案例记载，其中对皮肤痈和癌症的应用为中医治疗恶性黑色素瘤提供良好的治疗经验[9] ......