金燊懿，许玲

    白头翁汤对人肺腺癌细胞增殖及周期调控的影响

    金燊懿1，2，许玲1，3

    1.上海中医药大学，上海 200120；2.上海中医药大学附属曙光医院，上海 200120；3.上海中医药大学附属岳阳中西医结合医院，上海 200080

    观察白头翁汤对人肺腺癌细胞增殖及周期阻滞、促凋亡的影响，初步探讨其抗癌作用机制。以人肺腺癌细胞株A549、H1975细胞为研究对象，不同浓度白头翁汤干预后，运用CCK8法检测A549、H1975细胞增殖，细胞克隆形成实验观察A549、H1975细胞克隆形成，流式细胞术检测A549细胞周期，Western blot检测A549细胞周期相关蛋白CDK1、CyclinB1和细胞凋亡相关蛋白Caspase 8、9、3及PARP、Bcl2的表达。与对照组比较，不同浓度白头翁汤均能抑制A549、H1975细胞增殖和细胞克隆形成，不同浓度白头翁汤G2/M期细胞比例明显增加，且将A549肺腺癌细胞周期阻滞在G2/M期，0.2 mg/mL白头翁汤均明显降低CDK1、CyclinB1和Caspase 8、9、3及PARP、Bcl2蛋白的表达。白头翁汤有促进人肺腺癌细胞凋亡的作用，其机制可能与其降低细胞周期和细胞凋亡相关蛋白的表达有关。

    肺腺癌；白头翁汤；细胞增殖；细胞周期；细胞凋亡

    肺癌是世界上发病率和死亡率均位居前2位的恶性肿瘤，严重危害人类的健康[1]。腺癌是非小细胞肺癌常见的病理类型之一[2]。手术是根治早期肺腺癌的首选手段[3]。随着对肺腺癌发病机制深入研究，逐渐形成了以化疗、放疗、分子靶向治疗、免疫治疗等综合手段有效提高肺腺癌患者生存率、改善患者临床症状的治疗方案[4]。而上述治疗手段所涉及的抗癌理论中，调控细胞周期是一种经典的抗癌途径[5]。肿瘤是一类细胞周期失常疾病，因此，阻滞肿瘤细胞周期成为肿瘤治疗的重要策略之一。

    白头翁汤出自《伤寒杂病论》，由白头翁、黄柏、黄连和秦皮4味药物组成，主要功效为清热解毒、止痢凉血。临床主要用于治疗痢疾和消化系统肿瘤等[6-10]。而少有将本方用于治疗呼吸系统肿瘤，同时对白头翁汤内在的抗肿瘤机制研究较少，这无疑限制了白头翁汤临床上的扩展运用。本实验在前期文献研究的基础上，以体外细胞培养形式，运用CCK8法、细胞克隆形成实验、流式细胞术及Western blot方法，观察白头翁汤对肺腺癌细胞增殖及周期的影响，初步探讨其抗癌的作用机制。

    1 实验材料

    1.1 细胞

    人非小细胞肺腺癌细胞株A549、H1975 ......