松栀丸HPLC指纹图谱模式识别及大黄素含量测定
号峰,1仪器与试药,2方法与结果,1对照品溶液制备,2供试品溶液制备,3色谱条件,4方法学考察,5指纹图谱的建立及相似度评价,6化学模式识别,7大黄素含量测定,3讨论
粟倩,胡玉珍,罗堃,夏伯候,张智敏,李亚梅,林艳松栀丸HPLC指纹图谱模式识别及大黄素含量测定
粟倩,胡玉珍,罗堃,夏伯候,张智敏,李亚梅,林艳
湖南中医药大学药学院,湘产大宗药材品质评价湖南省重点实验室,湖南 长沙 410208
建立松栀丸HPLC指纹图谱并测定主要差异性成分大黄素的含量,为松栀丸质量评价提供依据。采用HPLC对3批松栀丸共60个样品进行检测,采用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统》(2.0版)计算相似度,运用主成分分析(PCA)和正交偏最小二乘-判别分析(OPLS-DA)对松栀丸进行模式识别,寻找差异性成分,并对其含量进行测定。建立了松栀丸的指纹图谱,标定了17个共有峰。3批样本的相似度为0.898~0.971。通过PCA和OPLS-DA基本能区分不同批次松栀丸,确定大黄素为松栀丸的主要差异性成分。3批松栀丸中大黄素含量分别为0.013 5~0.017 1 mg/g、0.036 7~0.043 6 mg/g、0.022 1~0.031 0 mg/g。HPLC图谱结合PCA和OPLS-DA可快速评价松栀丸的质量,为松栀丸的质量控制提供依据。
松栀丸;指纹图谱;大黄素;模式识别
松栀丸由茯苓、栀子根、穿破石、岗梅、地骨皮、太子参、砂仁、丹参等药加水蒸煮、浓缩、以水泛丸、干燥而成,具有清热利湿、健脾益气功效,主治慢性丙型肝炎[1]。松栀丸可有效改善慢性丙型肝炎患者临床症状、体征和肝功能,降低丙型肝炎病毒RNA定量,从而减轻肝脏损伤,尤其在改善肝功能及停药后的反跳率方面有优势[2]。松栀丸处方来源于湖南湘西侗族蒙氏家族祖传秘方,于2007年获国家食品药品监督管理局批准为中药第三类新药[3]。目前尚未见松栀丸指纹图谱和差异性化学成分的研究,无法对松栀丸的质量进行全面控制。
中药指纹图谱具有综合、宏观、非线性的特点,可对中药成分进行全面的分离及测定,反映中药的整体质量信息。通过指纹图谱特征相似程度的比较,可用于中药真伪鉴别、质量评价、考察稳定性和一致性[4-5]。运用多元统计分析方法,包括主成分分析(PCA)和正交偏最小二乘-判别分析(OPLS-DA),可降低多元数据的维数,并根据数据中固有模式对项目进行分类[6]。因此,本试验采用PCA、OPLS-DA对松栀丸HPLC指纹图谱进行分析,比较样品制备的差异性,为松栀丸的全面质量控制提供参考。
1 仪器与试药
Waters e2695高效液相色谱系统(包括Empower工作站、四元梯度泵、自动进样器、紫外检测器) ......
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