栾玉玲，花东明，陈相波，王芳，孔晓妮，冯煜

    扶正化瘀方药物血清对人脐带间充质干细胞增殖、迁移及旁分泌能力的影响

    栾玉玲1，花东明1，陈相波2，王芳1，孔晓妮1，冯煜1

    1.上海中医药大学附属曙光医院，上海 200120；2.杭州荣泽生物科技集团有限公司，浙江 杭州 311200

    观察扶正化瘀方药物血清对人脐带间充质干细胞(HUCMSCs)增殖、迁移及旁分泌能力的影响。贴壁法分离HUCMSCs，流式细胞术鉴定HUCMSCs表型并检测其分化能力；取第5代HUCMSCs，随机分为空白血清组及5%、10%、15%药物血清组，CCK-8法检测HUCMSCs增殖能力；克隆形成实验检测HUCMSCs增殖能力；划痕实验检测HUCMSCs迁移能力，测量划痕宽度并计算细胞迁移率。Transwell实验检测HUCMSCs迁移能力，统计迁移细胞数目。ELISA检测HUCMSCs旁分泌碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)能力。分离培养的HUCMSCs高表达标志物CD90(99.8%)、CD105(97.1%)、CD73(99.9%)、CD44(100%)，符合HUCMSCs表型特征并具有成脂/成骨分化功能。CCK-8结果显示，5%、10%、15%药物血清干预HUCMSCs后，均能促进HUCMSCs增殖(<0.05)。克隆形成实验结果显示，与空白血清组比较，5%、10%、15%药物血清组HUCMSCs克隆形成数量增加。划痕实验和Transwell实验结果显示，与空白血清组比较，5%、10%、15%药物血清组干预后，HUCMSCs迁移率明显升高(<0.01)，且随药物血清浓度增加，细胞迁移率呈上升趋势。ELISA结果显示，与同一时点空白血清组比较，5%、10%、15%药物血清组HUCMSCs旁分泌bFGF能力明显增强(<0.05)。扶正化瘀方药物血清对HUCMSCs增殖、迁移和旁分泌bFGF能力有明显促进作用。

    扶正化瘀方；人脐带间充质干细胞；细胞增殖；细胞迁移；旁分泌

    肝纤维化是肝脏对反复慢性炎症、坏死等损伤无效修复后形成的瘢痕组织，随着其程度加重，最终发展为肝硬化甚至肝癌。目前尚无特效药物进行治疗，临床以肝移植术作为终末期肝病唯一有效的治疗手段，但供体缺乏及免疫排斥限制其广泛应用[1]。人脐带间充质干细胞(HUCMSCs)移植术作为治疗肝纤维化的有效方案，其临床有效性不断得到证实[2-3]。但HUCMSCs在体外诱导增殖效率低、生物学功能易受培养环境影响，及其向肝脏迁移能力低等仍是亟待解决的问题[4]。扶正化瘀方可显著改善慢性丙型肝炎患者肝功能及肝纤维化程度[5] ......