周洪亮，翁燕，邵怡霖，黄亚威

    中药研究与开发

    HPLC指纹图谱结合化学模式识别的不同采收期酸枣仁质量对比研究

    周洪亮1，翁燕1，邵怡霖2，黄亚威1

    1.南京中医药大学附属医院，江苏 南京 210029；2.南京中医药大学，江苏 南京 210046

    建立不同采收期酸枣仁HPLC指纹图谱分析方法，通过指纹图谱动态变化及化学模式识别方法比较不同采收期酸枣仁化学成分指纹峰的差异，寻找差异性标志物，为酸枣仁最佳采收期的确定提供依据。采用HPLC，Agilent EC-C18色谱柱(150 mm×4.6 mm，4 μm)，以乙腈-0.1%磷酸水为流动相，梯度洗脱，流速1.0 mL/min，检测波长312 nm。采集不同采收期酸枣仁药材指纹图谱，对不同采收期酸枣仁进行相似度评价，运用聚类分析、主成分分析及正交偏最小二乘-判别分析(OPLS-DA)对样品进行化学模式识别研究。建立了酸枣仁药材的HPLC指纹图谱，共确定了14个共有峰，指认了2个成分，分别为斯皮诺素(4号峰)、6’’’-阿魏酰斯皮诺素(9号峰)；不同采收期的酸枣仁样品间相似度为0.906～1.000，不同的化学模式识别方法可对样品进行较好区分，OPLS-DA筛选出斯皮诺素等3个成分可能是影响酸枣仁质量的差异性标志物。通过HPLC指纹图谱和化学模式识别能够较好辨识影响酸枣仁质量的标志性成分，可为其最佳采收期的确定及质量控制提供依据。

    酸枣仁；采收期；指纹图谱；聚类分析；主成分分析；正交偏最小二乘-判别分析；差异性标志物；质量控制

    酸枣仁为鼠李科植物酸枣Mill. var.(Bunge)Hu ex H. F. Chou的干燥成熟种子，具有宁心安神、养心补肝、敛汗之功[1]，主要用于失眠[2-5]、焦虑[6]、抑郁[7-8]等的治疗。

    目前，酸枣仁主要来源于野生酸枣，其资源通常分布于无明确权属的山林。为获取更大利益，产地从业人员通常在八月中旬(酸枣尚未成熟时)开始大量抢收，即“抢青”采收，与药典规定的“秋末冬初采收成熟果实”存在较大差异。周赛男等[9]研究显示，42批2016年产酸枣仁中仅23批斯皮诺素含量合格，合格率为54.8%；32批2017年产酸枣仁中仅16批斯皮诺素含量合格，合格率仅为50.0%。可见，斯皮诺素不合格现象非常严峻，其原因可能与酸枣仁“抢青”采收相关。目前关于“抢青”采收对酸枣仁的质量影响主要以监测斯皮诺素、酸枣仁皂苷含量为主[9-12]，尚未见采用指纹图谱对不同采收期酸枣仁化学成分进行全程监控，并结合多元统计分析对成熟度进行判断的报道 ......