李杨乐，杨锋，樊静杰，郑晓慧，朱芮，郑洁，3

    1.陕西中医药大学针灸推拿学院，陕西 咸阳 712046；2.陕西中医药大学第一临床医学院，陕西 咸阳 712046；3.陕西省针药结合重点实验室，陕西 咸阳 712046

    骨性关节炎(osteoarthritis，OA)是始于关节软骨退变，并逐渐累及滑膜、软骨下骨、肌腱及韧带等关节周围多种组织的复杂性退行性关节疾病，我国尤以膝骨关节炎(knee osteoarthritis，KOA)高发。OA患病率与年龄呈正相关，我国60岁以上人群OA患病率为50%，75岁以上人群患病率高达80%。疼痛是OA的首要症状，随着病情发展，出现长期持续性慢性疼痛，也是引起患者关节功能障碍及生活质量下降的重要因素。OA长期持续性疼痛并非关节局部损害引起的单纯感受伤害性疼痛，还包括神经病理性疼痛。脊髓背角是痛觉信息传递与调控的第一站，脊髓水平的中枢敏化是感受伤害性疼痛发展为神经病理性疼痛的重要环节。研究发现，KOA慢性疼痛大鼠脊髓背角痛觉反射通路异常活跃，大鼠患侧足底皮肤对机械刺激表现出较强的脊髓反应，这一过程可能与MAPK 信号通路活化密切相关。大麻素受体2(CB2R)是内源性大麻素系统的重要组成部分，脊髓CB2R激活后可通过抑制MAPK信号通路发挥抑制神经病理性疼痛作用。电针可缓解KOA慢性疼痛及综合症状，提高患者生活质量。本实验以谷氨酸钠碘乙酸(MIA)诱导KOA慢性疼痛大鼠模型，观察电针“阳陵泉”“内膝眼”对大鼠痛性行为学、脊髓背角CB2R、p-P38和p-ERK表达的影响，从脊髓水平揭示电针治疗KOA慢性疼痛的作用机制。

    1 材料与方法

    1.1 动物与分组

    SPF级雌性SD大鼠48只，体质量220～260 g，成都达硕实验动物有限公司提供，动物生产许可证号SCXK(川)2020-030。饲养于陕西中医药大学动物实验中心，温度24～26 ℃，湿度50%～60%，12 h光/暗循环，自由摄食饮水。实验过程严格遵守科技部颁布的《关于善待实验动物的指导性意见》。

    1.2 主要试剂与仪器

    谷氨酸钠碘乙酸(MIA，货号S30680，上海源叶生物科技有限公司)，CB2R阻断剂AM630(货号HY-15421，上海碧云天生物技术有限公司)，CB2R一抗(货号PA1-746A，美国Invitrogen公司)，p-ERK一抗(货号ab0011，英国Abcam公司) ......