刘检，蔺晓源，赵洪庆，杨蕙，周梓洋，刘平安，3，王宇红，4

    1.湖南中医药大学第一附属医院，湖南 长沙 410007；2.湖南中医药大学科技创新中心，湖南 长沙 410208；3.湖南中医药大学中医学国内一流建设学科，湖南 长沙 410208；4.抑郁类疾病中医药防治湖南省重点实验室，湖南 长沙410208

    类风湿关节炎(rheumatoid arthritis，RA)是一种常见的慢性自身免疫性疾病，临床主要表现为晨僵、滑膜炎、对称性关节肿痛[1]。RA所致躯体损伤、生理功能受限等反应会导致患者产生精神症状，其中以抑郁最为常见。中国大陆RA发病率为0.42%，患者人数约500 万[2]，其中40%～60%伴有不同程度的抑郁症状[3-4]。RA 伴抑郁症(rheumatoid arthritis accompanied by depression，RAD)发病隐匿，病情反复，严重影响患者生活质量和身心健康，故研究RAD的发病机制及防治药物具有重要意义。

    目前RAD发病机制尚未明确。研究显示，RA状态下，外周炎性因子水平升高，血脑屏障被破坏，炎性因子进入中枢后，通过FKN/CX3CR1信号通路导致小胶质细胞异常活化，损伤海马神经元，进而诱发抑郁[5-7]。RAD属中医学“痹证”“郁证”范畴，为虚实夹杂之证，具有“虚、瘀、郁”的病机特点。课题组立补肾祛寒、活血通络、疏肝解郁治法，拟壮骨止痛解郁方。前期研究发现，壮骨止痛解郁方能明显改善RAD 模型大鼠抑郁症状，其机制可能与调节FKN/CX3CR1信号通路有关[8]，但具体机制仍有待阐明。因此，本研究建立细胞共培养体系并模拟RAD环境的体外细胞模型，基于FKN/CX3CR1信号通路进一步探讨壮骨止痛解郁方防治RAD的作用机制。

    1 实验材料

    1.1 动物

    SPF级雌性SD大鼠3只，受孕16～18 d；SPF级SD大鼠4只，雌雄各半，新生3～4 d；SD大鼠8只，雌雄各半，体质量180～220 g，均购于湖南斯莱克景达实验动物有限公司，动物许可证号SCXK(湘)2019-0004。本实验经湖南中医药大学第一附属医院实验动物伦理委员会审批(HN-ZYFY-2021-12-10)。

    1.2 细胞

    大鼠滑膜细胞，武汉普诺赛生命科技有限公司，货号CP-R083。大鼠脑微血管内皮细胞，武汉原生原代生物医药科技有限公司，货号RAT-CELL-0039。

    1.3 药物

    壮骨止痛解郁方(补骨脂15 g ......