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编号:548247
基于NF-κB信号通路探讨益气活血托毒方对自身免疫性前列腺炎小鼠的影响
http://www.100md.com 2023年8月23日 中国中医药信息杂志 2023年第8期
造模,1材料与方法,1动物,2药物及制备,3主要试剂与仪器,4前列腺蛋白提纯液制备,5造模,6分组及给药,7指标检测,8统计学方法,2结果,1益气活血托毒方对模型小鼠一般状况的影响,2益气
     张泽家,杨小琴,高庆和,陈豪特,丁家森,刘剑刚,高瞻

    中国中医科学院西苑医院,北京 100091

    Ⅲ型前列腺炎是一种以长期、反复骨盆区域疼痛不适,可伴有不同程度排尿症状及性功能障碍为主要临床表现的疾病,严重影响患者生活质量[1]。研究显示,免疫因素在Ⅲ型前列腺炎的发生发展过程中发挥重要作用[2]。中国中医科学院西苑医院高瞻教授基于“内痈”理论及临床经验拟定的益气活血托毒方能显著缓解Ⅲ型前列腺炎患者临床症状,降低慢性前列腺炎症状评分,减少患者前列腺液中炎症因子表达[3],但其作用机制尚未完全明确。课题组前期研究发现,益气活血托毒方与Ⅲ型前列腺炎的交集靶点主要富集在核转录因子-κB(NF-κB)通路上,故预测益气活血托毒方可能通过降低前列腺组织炎症因子水平,阻止其下游NF-κB抑制物激酶(IKKs)磷酸化及NF-κB抑制蛋白α(IκBα)与NF-κB二聚体解离,从而抑制NF-κB进入细胞核内催化炎症因子产生和激活免疫反应。目前认为,Ⅲ型前列腺炎发病与自身免疫关系密切,自身免疫性前列腺炎(experimental autoimmune prostatitis,EAP)小鼠模型是研究Ⅲ型前列腺炎的标准动物模型之一[4]。基于此,本研究应用前列腺蛋白提纯液联合弗氏完全佐剂建立EAP小鼠模型,观察益气活血托毒方对EAP小鼠前列腺组织病理变化、炎症反应及免疫功能等方面的影响,探讨其治疗Ⅲ型前列腺炎的作用机制。

    1 材料与方法

    1.1 动物

    SPF 级8 周龄C57BL/6 雄性小鼠60 只,体质量(23±2)g,8 周龄雄性SD 大鼠10 只,体质量(180±20)g,斯贝福(北京)生物技术有限公司提供,动物生产许可证号SCXK(京)2019-0030,合格证号110324211104281256。饲养于中国中医科学院西苑医院SPF级动物房,温度(24±2)℃、湿度50%~70%环境,动物使用许可证号SYXK(京)2018-0018。本实验经中国中医科学院西苑医院伦理委员会审批(2021XLC043-2)。

    1.2 药物及制备

    益气活血托毒方由黄芪30 g、党参15 g、丹参15 g、川芎10 g、白术10 g、茯苓10 g、熟大黄6 g组成,由中国中医科学院西苑医院制剂室制成浸膏,每克浸膏含原药材2.5 g。盐酸坦索罗辛缓释胶囊,0.2 mg/粒,江苏恒瑞医药股份有限公司,临用前取胶囊内容物,用蒸馏水配制成0.65 μg/mL溶液。

    1.3 主要试剂与仪器 ......

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