王琳 ，刘亚华 ，韩煦， ，金燊懿 ，陈清光， ，陆灏，

    1.上海中医药大学附属曙光医院，上海 201203；2.上海中医药大学附属曙光医院糖尿病研究所，上海 201203

    肥胖是由遗传和环境共同作用导致的慢性代谢性疾病，近年来已成为全球重要公共卫生问题之一。2020年我国居民营养与慢性病状况报告显示，18岁及以上成人超重/肥胖超过半数[1]。肥胖是心血管疾病(cardiovascular diseases，CVD)的危险因素，肥胖人群更易出现心脏代谢异常。近年来，过度肥胖导致的血管功能障碍引起众多研究者关注[2-3]。中医学认为，肥胖病机为“胃强脾弱”，导致痰湿、气郁、血瘀。课题组应用健脾清化方治疗肥胖型糖尿病具有减重作用，给药6周可降低肥胖小鼠体质量、脂肪含量，改善脂肪异位沉积[4]，且对代谢综合征患者血管内皮具有保护作用[5-6]，但其作用机制尚不明确。本研究以高脂饲料喂养诱导肥胖小鼠模型，观察健脾清化方对肥胖小鼠血管内皮的保护作用，并初步探讨其作用机制，为后续研究提供实验依据。

    1 实验材料

    1.1 动物

    SPF级雄性C57BL/6小鼠30只，6周龄，体质量(18±2)g，北京维通利华实验动物技术有限公司上海分公司提供，生产许可证号SCXK(沪)2017-0011。饲养于SPF级实验室，所有操作严格遵守上海中医药大学实验动物伦理规定，并经过伦理委员会审批(PZSHUTCM210903001)。高脂饲料，美国Research Diets公司，货号D12492。

    1.2 药物及制备

    健脾清化方(党参15 g，黄芪15 g，黄芩9 g，黄连3 g，黄精15 g，山药15 g，葛根15 g，鬼箭羽15 g)，饮片购自上海中医药大学附属曙光医院中药房，并委托制剂科制成中药浸膏。具体方法：饮片加1 000 mL蒸馏水浸泡1 h，常规煎煮2次，每次30 min，过滤，将2次药液混合，浓缩成含原药材1.3 g/g浸膏，置于4 ℃冰箱保存。盐酸二甲双胍片，瑞士默克雪兰诺公司，0.5 g/片，批号LTABQ 2691。将药片碾碎后溶于生理盐水，制成30 mg/mL混悬液。

    1.3 试剂与仪器

    无水乙醇(国药集团化学试剂有限公司，批号100092683)，二甲苯(国药集团化学试剂有限公司，批号10023418)，HE 染液套装(武汉塞维尔，批号G1003)，Masson 三色染色液(武汉塞维尔，批号G1006)，中性树胶(国药集团化学试剂有限公司 ......