张朝宁 ，张志明 ，余臣祖

    1.甘肃中医药大学附属医院，甘肃 兰州 730020；2.甘肃省中西医结合肿瘤临床医学研究中心，甘肃 兰州 730020

    放射性肺损伤(radiation-induced lung injury，RILI)是胸部恶性肿瘤放疗最常见和最致命的并发症之一，发生率约15%[1]。RILI是限制放疗有效剂量的主要因素，严重影响放疗方案的顺利实施和治疗效果。RILI分为2个阶段，早期表现为渗出性炎症反应，即放射性肺炎，若继续恶化则在中晚期表现为放射性肺纤维化[2]。氧化应激是RILI的主要原因，放疗产生的活性氧(ROS)贯穿病程始终，对放射性肺炎和肺纤维化都有促进作用，因而抗氧化对RILI 治疗具有重要意义[3]。

    近年研究显示，铁死亡也参与RILI发生过程[4]，铁死亡是Dixon等[5]发现的细胞死亡方式，以毒性脂质过氧化物累积所致氧化代谢失衡为特征。细胞内铁超载是铁死亡发生的基础，而过多的活性铁可由铁自噬产生。铁自噬是依赖核受体辅激活因子4(NCOA4)的新型自噬类型，铁自噬启动后，铁蛋白被输送到自噬小体，与溶酶体融合后降解为游离铁离子，通过芬顿反应产生大量ROS，导致铁死亡发生[6]。因此，抑制铁自噬调控铁死亡可能减轻氧化应激反应，为RILI防护提供新思路。

    大补脾汤出自敦煌医学卷子《辅行诀脏腑用药法要》，有补益脾肺、益气滋阴之效。研究发现，大补脾汤对RILI有一定保护作用[7-8]。本实验基于NCOA4介导的铁自噬调控铁死亡探讨大补脾汤对RILI大鼠的抗氧化作用及作用机制，为RILI防护提供参考。

    1 实验材料

    1.1 动物

    健康SPF级雄性SD大鼠30只，2～3月龄，体质量180～220 g，兰州大学实验动物中心提供，动物许可证号SCXK(甘)2018-0002。饲养于兰州大学实验动物中心SPF 级实验室，温度20～25 ℃、相对湿度40%～70%，使用许可证号SYXK(甘)2018-0005。

    1.2 药物及制备

    大补脾汤(人参、炙甘草、干姜各15 g，白术、麦冬、五味子、旋覆花各5 g)，饮片购自甘肃中医药大学附属医院中药房。由甘肃中医药大学中药制药实验室按传统煎药法煎煮2次，合并药液，以100目滤布过滤，滤液经旋转、蒸发、浓缩，按人与大鼠体表面积折算，配制成含原药材1.214 g/mL药液。参考前期研究基础[7]，按照上述药液浓度的0.5、2倍，再分别配制成0.607、2.428 g/mL药液 ......