延龄草总皂苷对卒中后认知障碍大鼠学习记忆能力和神经元突触损伤的影响
奈哌,象限,1材料与方法,1动物,2药物,3主要试剂与仪器,4分组,造模及给药,5Morris水迷宫实验,6HE,尼氏染色,7TUNEL染色,8高尔基染色,9Westernblot检测,10统
王刚 ,杨丹 ,段壬泽 ,杨丽君 ,陈娟 赵方毓 ,陈显兵1.湖北民族大学附属民大医院,湖北 恩施 445000; 2.湖北民族大学医学部,湖北 恩施 445000
卒中后认知障碍(post-stroke cognitive impairment,PSCI)是指在卒中后6个月内发生的从轻度认知损害到痴呆的一系列综合征,是临床常见的脑血管病变及神经退行性疾病[1]。2020年发布的《中国卒中报告》显示,我国卒中患病率为1.11%,年发病率为0.25%,病死率为0.15%,其中约1/3的卒中患者会经历PSCI[2]。
PSCI发病机制复杂,目前普遍认为,脑血管病变引起脑部缺血或出血,进而导致脑神经解剖结构损害是其主要发病机制[3]。在卒中期间,被剥夺正常代谢底物耗氧和耗能的神经元在几秒内停止正常运作,并在2 min内显示出结构性损伤的迹象[4]。随着能量依赖过程的加重,神经元无法维持其正常生理功能,导致细胞凋亡,最终损害感觉和运动功能。近年来,随着神经外科手术的发展,越来越多的患者在急性脑卒中后幸存下来,但大多数患者术后仍患有持续的感觉运动和认知功能障碍[5]。
延龄草为百合科延龄草属植物延龄草Trillium tschonoskiiMaxim的干燥根茎,味甘,性平,有小毒。研究发现,延龄草总皂苷具有抗氧化、延缓衰老、促进学习记忆等作用[6-7],但其对脑卒中后引发的神经疾病的作用研究较少。本研究采用改良线栓法制备PSCI大鼠模型,初步探讨延龄草总皂苷对PSCI大鼠学习记忆能力及海马神经元突触损伤的影响及作用机制,为PSCI临床治疗提供实验依据。
1 材料与方法
1.1 动物
清洁级6~7周龄雄性SD大鼠60只,体质量(200±20)g,三峡大学实验动物中心提供,动物许可证号SCXK ( 鄂) 2017-0012, 动物合格证号42010200005116。饲养于湖北民族大学医学部清洁动物房,温度23~25 ℃,相对湿度50%~60%,适应性饲养1周。本研究经湖北民族大学医学伦理委员会审批(202159)。
1.2 药物
延龄草采自恩施,由湖北民族大学中药实验室鉴定为百合科延龄草属植物延龄草的干燥根茎。药材洁净后,经干燥、粉碎、提取、药液过滤、浓缩干燥,最终得含量为61.48%的延龄草总皂苷,称取1 g延龄草总皂苷,加入100 mL双蒸水溶解备用。盐酸多奈哌齐片,批号0000001782,浙江华海药业,5 mg/片,将5 mg药片研粉 ......
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