白慧茹 崔春霞 宋芳 顾捷 苏丽娟 刘萨日娜(内蒙古医科大学，010059)

    IL-8RB mRNA和IL-8RB蛋白在妊娠早期小鼠子宫内膜的表达

    白慧茹 崔春霞 宋芳 顾捷 苏丽娟 刘萨日娜(内蒙古医科大学，010059)

    目的 研究妊娠早期小鼠子宫内膜中IL-8RB在mRNA水平和蛋白质水平的表达情况。方法 应用半定量RT-PCR、免疫组织化学显色和图像分析技术，观察IL-8RB在妊娠1 d、4 d、5 d、6 d小鼠子宫内膜中的表达情况。结果 免疫组化染色结果显示在子宫内膜腔上皮，IL-8RB于妊娠4 d表达最强，妊娠5 d开始逐渐下降，妊娠6 d降至妊娠1 d水平；在子宫内膜腺上皮和基质，IL-8RB的表达水平随妊娠天数的增加而逐渐升高。RT-PCR结果显示IL-8RB mRNA表达规律与IL-8RB蛋白在子宫内膜腔上皮的表达相一致。结论 IL-8RB可能通过与其配体白细胞介素-8结合而参与小鼠胚泡着床过程。

    IL-8RB；子宫内膜；着床；逆转录多聚酶链反应；免疫组织化学

    目前已知白细胞介素-8(interleukin-8，IL-8)的受体有IL-8RA(IL-8 receptor A)和IL-8RB，均属于G蛋白偶联受体[1]，其中IL-8RB与IL-8的亲和力强于IL-8RA。IL-8RB主要表达于中性粒细胞表面，正常月经周期子宫内膜的上皮细胞、基质细胞也有表达[2]，但是其在妊娠早期子宫内膜的表达情况尚不清楚。本研究运用半定量RT-PCR、免疫组织化学的方法检测妊娠早期小鼠子宫内膜IL-8RB的表达，为进一步阐述它在小鼠胚泡着床过程中的作用机制提供可能的动物实验资料。

    1 资料与方法

    1.1 研究对象 妊娠小鼠：昆明种动情期雌鼠与同品系雄鼠2∶1合笼，次日清晨发现阴栓者为妊娠1 d的小鼠。子宫内膜组织标本：分别于妊娠1 d、4 d、5 d、6 d用断颈法处死雌鼠，迅速剪开腹腔，取双侧子宫，标本分为两份，一份用Bouin液固定，常规石蜡包埋；另一份冻存于-80℃，以供提取RNA用。

    1.2 主要试剂 兔抗人IL-8RB多克隆抗体购于Santa Cruz公司；PV-6001免疫组化试剂盒、DAB显色试剂盒购于北京中杉金桥生物技术有限公司。RNArose Reagent购于上海华舜生物工程有限公司；通用RT-PCR试剂盒购于北京博大泰克生物基因技术有限责任公司；IL-8RB和内参照β-actin的引物均委托大连宝生物工程有限公司合成。

    1.3 免疫组织化学染色 切片常规脱蜡至水；3%H2O2去离子水室温闭光孵育15 min ......